PROTEIN HAVING LACCASE ACTIVITY

• Main Authors: KONO, Takunari, UZURA, Atsuko, UMEDA, Mana
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 29.02.2024
• Subjects: BASIC ELECTRIC ELEMENTS; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ELECTRICITY; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OR MEANS, e.g. BATTERIES, FOR THE DIRECT CONVERSIONOF CHEMICAL INTO ELECTRICAL ENERGY; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Provided is a novel cupper efflux oxidase (CueO) variant having improved activity compared to wild types. A protein according to one or more embodiments of the present invention has laccase activity and comprises the amino acid sequence of [1] or [2]: [1] the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 into which mutations (a) and (b) have been introduced, mutation (a) being substitution of D360 with another amino acid other than D, and mutation (b) being at least one selected from substitution of G304 with another amino acid other than G, substitution of D373 with another amino acid other than D, and substitution of Q374 with another amino acid other than Q, the amino acid sequence including at least a region from position 29 to position 516; [2] the amino acid sequence having at least 90% sequence identity with the amino acid of [1], in which amino acid residues corresponding to position 360, position 304, position 373, and position 374 of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14 are identical to those of the amino acid sequences of [1]. La présente invention concerne un nouveau variant d'oxydase à cuivre périplasmique (CueO) présentant une activité améliorée par comparaison avec les types sauvages. Une protéine selon un ou plusieurs modes de réalisation de la présente invention présente une activité laccase et comprend la séquence d'acides aminés de [1] ou [2] : [1] la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 14 dans laquelle les mutations (a) et (b) ont été introduites, la mutation (a) étant la substitution de D360 par un autre acide aminé que D, et la mutation (b) étant au moins l'une choisie parmi la substitution de G304 par un autre acide aminé que G, la substitution de D373 par un autre acide aminé que D, et la substitution de Q374 par un autre acide aminé que Q, la séquence d'acides aminés comprenant au moins une région allant de la position 29 à la position 516 ; [2] la séquence d'acides aminés présentant une identité de séquence d'au moins 90 % avec l'acide aminé de [1], les résidus d'acides aminés correspondant à la position 360, à la position 304, à la position 373 et à la position 374 de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 14 étant identiques à ceux des séquences d'acides aminés de [1]. 野生型と比較して活性が向上した新たなＣｕｅＯ変異体を提供する。本発明の一以上の実施形態に係るタンパク質は、［１］又は［２］のアミノ酸配列：［１］配列番号１４のアミノ酸配列において、（ａ）及び（ｂ）の変異：（ａ）Ｄ３６０のＤ以外のアミノ酸への置換；（ｂ）Ｇ３０４のＧ以外のアミノ酸への置換、Ｄ３７３のＤ以外のアミノ酸への置換、及び、Ｑ３７４のＱ以外のアミノ酸への置換から選択される１以上、が導入されたアミノ酸配列のうち、少なくとも第２９位～第５１６位の領域を含むアミノ酸配列、［２］前記［１］のアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有し、配列番号１４のアミノ酸配列の第３６０位、第３０４位、第３７３位及び第３７４位に対応するアミノ酸残基が前記［１］のアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列を含み、且つ、ラッカーゼ活性を有する。