ENGINEERED ACR PROTEINS FOR MODULATING CRISPR ACTIVITY

Provided are compositions and methods that include an engineered anti-CRISPR (Acr) protein that can achieve a balance in which Cas proteins retain activity to perform on-target nucleic acid targeting functions (e.g., DNA cleavage for gene editing applications), but are inhibited by a subject Acr pro...

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Main Authors SHELLE, Michael, RABUKA, David, DE TACCA, Luisa Mayumi Arake, SHARRAR, Allison
Format Patent
LanguageEnglish
French
Published 08.02.2024
Subjects
BEER
BIOCHEMISTRY
CHEMISTRY
COMPOSITIONS THEREOF
CULTURE MEDIA
ENZYMOLOGY
METALLURGY
MICROBIOLOGY
MICROORGANISMS OR ENZYMES
MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
ORGANIC CHEMISTRY
PEPTIDES
PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS
SPIRITS
VINEGAR
WINE
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Summary:Provided are compositions and methods that include an engineered anti-CRISPR (Acr) protein that can achieve a balance in which Cas proteins retain activity to perform on-target nucleic acid targeting functions (e.g., DNA cleavage for gene editing applications), but are inhibited by a subject Acr protein to a degree that decreases off-target activity - thus resulting in an increased ratio of on-target to off-target nucleic acid targeting events. In some cases, a subject composition (e.g., a subject system) includes a CRISPR nuclease or a nucleic acid encoding it. Methods of using a subject Acr polypeptide together with a CRISPR nuclease to achieve target nucleic acid modification are provided. L'invention concerne des compositions et des procédés qui comprennent une protéine anti-CRISPR (Acr) modifiée qui peut atteindre un équilibre dans lequel les protéines Cas conservent leur activité pour effectuer des fonctions de ciblage d'acide nucléique sur cible (par exemple, le clivage de l'ADN pour des applications d'édition de gène), mais sont inhibées par une protéine Acr sujet à un degré qui diminue l'activité hors cible, ce qui permet d'obtenir un rapport accru entre les événements de ciblage d'acide nucléique sur cible et hors cible. Dans certains cas, une composition d'objet (par exemple, un système d'objet) comprend une nucléase CRISPR ou un acide nucléique codant pour celle-ci. L'invention concerne également des procédés d'utilisation d'un polypeptide Acr d'objet conjointement avec une nucléase CRISPR pour obtenir une modification d'acide nucléique cible.
Bibliography:Application Number: WO2023US68149