METHODS AND SYSTEMS FOR REAL-TIME, CONTINUOUS PRODUCTION OF NON-VIRAL CARRIER NUCLEIC ACID PARTICLES

• Main Authors: HENRY, David, WALERACK, Corinne, CERATO-NOYERIE, Carine, HALLER, Samantha Sophie Catherine, PÉCHEUL, Marylène Denise Madeleine
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 31.08.2023
• Subjects: APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MIXING, e.g. DISSOLVING, EMULSIFYING, DISPERSING; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PERFORMING OPERATIONS; PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; TRANSPORTING; VINEGAR; WINE

Methods and systems are provided for transfecting cells using real-time, continuous transfection of cells. In some aspects, the methods can be applied for the continuous production of non-viral vector nucleic acid complexes. The systems and methods include a passive mixing fluidic module with at least two inlets, a plurality of mixing elements, and an outlet to provide a continuous flow of transfection complexes to a cell reactor. The transfection agent and nucleic acid are passively mixed and then provided to cells in a continuous flow of cell medium. In some aspects, the flow of cell medium perfusing through the cell reactor recirculates. The system and the methods of the present disclosure provide for highly reproducible and scalable transfection with a low coefficient of variation. L'invention concerne également des procédés et des systèmes pour transfecter des cellules à l'aide d'une transfection continue en temps réel de cellules. Dans certains aspects, les procédés peuvent être appliqués pour la production continue de complexes d'acides nucléiques vecteurs non viraux. Les systèmes et les procédés comprennent un module fluidique de mélange passif avec au moins deux entrées, une pluralité d'éléments de mélange, et une sortie pour fournir un flux continu de complexes de transfection à un réacteur cellulaire. L'agent de transfection et l'acide nucléique sont mélangés passivement puis fournis à des cellules dans un flux continu de milieu cellulaire. Selon certains aspects, le flux de milieu cellulaire perfusant à travers le réacteur cellulaire est remis en circulation. Le système et les procédés de la présente invention permettent une transfection hautement reproductible et évolutive avec un faible coefficient de variation.