ANTIBIOTIC SUSCEPTIBILITY TEST

• Main Author: KITTLE, Joseph D
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 20.04.2023
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

A method for determining the susceptibility of a bacteria to an antibiotic, comprising transferring one portion of a sample containing living bacterial cells into a bacterial growth medium to create a control sample; transferring another portion of the sample into a bacterial growth medium to which a predetermined amount of antibiotic or predetermined amount of a library of antibiotics has been added to create a test sample; adding an alkyne-modified non-canonical amino acid to both the control sample and test sample during bacterial growth, wherein the alkyne-modified non-canonical amino acid incorporates into surface proteins, internal proteins, or both; reacting the alkyne-containing proteins with an azide-modified detection molecule using click-chemistry to label the cells; detecting the labeled cells using a method that generates a detectable signal; and comparing the signal generated by the control sample to the signal generated by the test sample, wherein a decrease in detectable signal between the control sample and the test sample is indicative of susceptibility of the living bacteria to the predetermined antibiotic or predetermined library of antibiotics. L'invention concerne une méthode de détermination de la sensibilité d'une bactérie à un antibiotique, consistant à transférer une partie d'un échantillon contenant des cellules bactériennes vivantes dans un milieu de croissance bactérienne pour créer un échantillon témoin ; à transférer une autre partie de l'échantillon dans un milieu de croissance bactérienne auquel une quantité prédéterminée d'antibiotique ou une quantité prédéterminée d'une bibliothèque d'antibiotiques a été ajoutée pour créer un échantillon d'essai ; à ajouter un acide aminé non canonique modifié par alcyne à la fois à l'échantillon témoin et à l'échantillon d'essai pendant la croissance bactérienne, l'acide aminé non canonique modifié par alcyne étant incorporé dans des protéines de surface, des protéines internes, ou les deux ; à faire réagir les protéines contenant un alcyne avec une molécule de détection modifiée par azide à l'aide d'une chimie clic pour marquer les cellules ; à détecter les cellules marquées à l'aide d'une méthode qui génère un signal détectable ; et à comparer le signal généré par l'échantillon témoin au signal généré par l'échantillon d'essai, une diminution du signal détectable entre l'échantillon témoin et l'échantillon d'essai indiquant la sensibilité des bactéries vivantes à l'antibiotique prédéterminé ou à une bibliothèque prédéterminée d'antibiotiques.