SOLUBLE EXPRESSION OF PROTEIN USING PEPTIDE TAG

• Main Authors: TAKITA, Eiji, MATSUI, Takeshi, KOIKE, Kazuyoshi
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 05.03.2020
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

In the present invention, by connecting a peptide tag having the amino acid sequence below to a target protein and causing the target protein to be expressed, the target protein is efficiently accumulated in a soluble fraction. X(PY)qPZ, where P represents proline, X represents an amino acid sequence comprising 0-5 amino acids independently selected from the group consisting of arginine (R), glycine (G), serine (S), lysine (K), threonine (T), leucine (L), asparagine (N), glutamine (Q), and methionine (M), Y represents an amino acid sequence comprising 1-4 amino acids independently selected from the group consisting of R, G, K, T, L, N, Q, and M, q is an integer of 1-10, Z represents an amino acid sequence comprising 0-10 amino acids independently selected from the group consisting of R, G, S, K, T, L, N, Q, and M, and a total of three or more of Q, M, L, N, and T are included in the amino acid sequence of the peptide tag. Dans la présente invention, en reliant une étiquette peptidique ayant la séquence d'acides aminés ci-dessous à une protéine cible et en amenant la protéine cible à être exprimée, la protéine cible est accumulée de manière efficace dans une fraction soluble. X(PY)qPZ, où P représente la proline, X représente une séquence d'acides aminés comprenant de 0 à 5 acides aminés indépendamment sélectionnés dans le groupe constitué de l'arginine (R), de la glycine (G), de la sérine (S), de la lysine (K), de la thréonine (T), de la leucine (L), de l'asparagine (N), de la glutamine (Q), et de la méthionine (M), Y représente une séquence d'acides aminés comprenant de 1 à 4 acides aminés indépendamment sélectionnés dans le groupe constitué de R, G, K, T, L, N, Q, et M, q est un nombre entier ayant une valeur de 1 à 10, Z représente une séquence d'acides aminés comprenant de 0 à 10 acides aminés indépendamment sélectionnés dans le groupe constitué de R, G, S, K, T, L, N, Q, et M, et un total de trois ou plus de Q, M, L, N, et T sont compris dans la séquence d'acides aminés de l'étiquette peptidique. 目的タンパク質に下記のアミノ酸配列を有するペプチドタグを連結して発現させることで目的タンパク質を効率よく可溶性画分に蓄積させる。　Ｘ(ＰＹ)qＰＺ Ｐはプロリンを示し、 Ｘはアルギニン（Ｒ）、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）およびメチオニン（Ｍ）からなる群より独立に選択される０～５個のアミノ酸からなるアミノ酸配列を示し、 ＹはＲ、Ｇ、Ｋ、Ｔ、Ｌ、Ｎ、ＱおよびＭからなる群より独立に選択される１～４個のアミノ酸からなるアミノ酸配列を示し、 ｑは１～１０の整数を示し、 ＺはＲ、Ｇ、Ｓ、Ｋ、Ｔ、Ｌ、Ｎ、ＱおよびＭからなる群より独立に選択される０～１０個のアミノ酸からなるアミノ酸配列を示し、 前記ペプチドタグのアミノ酸配列中には、Ｑ、Ｍ、Ｌ、ＮおよびＴが合計で３つ以上含まれる。