STEM CELL DERIVED LINEAGE BARCODING

• Main Authors: LACAYO, Catherine I, BOTELHO, Salome Calado, DE ABREU RIBEIRO, M. Susana G, LUDLAM, Mary J.C
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 27.02.2020
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention provides multicistronic reporter vectors, acceptor stem cells for receiving multicistronic reporter vectors, and multireporter cells for use in assays for profiling two or more polypeptides in live cells, wherein the vectors comprise a reporter polypeptide under the control of a lineage specific promoter to act as a barcode for a specific cell type. Methods of making multicistronic reporter vectors, acceptor cells for receiving multicistronic reporter vectors, and multireporter cells are provided. Libraries and kits comprising multicistronic reporter vectors, acceptor cells for receiving multicistronic reporter vectors, and multireporter cells are provided. Methods of profiling/assaying the multireporter cells and multireporter cell libraries are provided. La présente invention concerne des vecteurs rapporteurs multicistroniques, des cellules souches d'accepteur pour recevoir des vecteurs rapporteurs multicistroniques, et des cellules multi-rapporteurs pour une utilisation dans des dosages afin de profiler au moins deux polypeptides dans des cellules vivantes, lesdits vecteurs comprenant un polypeptide rapporteur sous le contrôle d'un promoteur spécifique de lignée pour agir en tant que code à barres pour un type de cellule spécifique. L'invention concerne aussi des procédés d'élaboration de vecteurs rapporteurs multicistroniques, des cellules d'accepteur pour recevoir des vecteurs rapporteurs multicistroniques, et des cellules multi-rapporteurs. Des banques et des kits comprenant les vecteurs rapporteurs multicistroniques, les cellules d'accepteur destinées à les recevoir, et les cellules multirapporteurs selon l'invention sont en outre décrits, ainsi que des procédés de profilage/dosage des cellules multirapporteurs et des banques de cellules multirapporteurs.