MODIFIED IMMUNOGLOBULIN κ CHAIN VARIABLE REGION-BINDING PEPTIDE

• Main Authors: MURATA, Dai, KONOIKE, Fuminori, YOSHIDA, Shinichi
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 03.10.2019
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

A purpose of the present invention is to provide: an immunoglobulin κ chain variable region-binding peptide that is capable of specifically binding to a protein containing immunoglobulin κ chain variable region and has a high chemical stability to, in particular, alkali solutions; an affinity separation matrix having the peptide as a ligand; and a method for producing a κ chain variable region-containing protein with the use of the affinity separation matrix. Another purpose of the present invention is to provide: a DNA encoding the aforesaid peptide; a vector containing the DNA; and a transformant transformed by the vector. These problems are solved by using, as an affinity ligand, a peptide obtained by introducing a mutation into an appropriate site of the κ chain variable region-binding domain of a protein L derived from a Peptostreptococcus magnus strain. L'objectif de la présente invention est de fournir : un peptide de liaison à une région variable de chaîne κ d'immunoglobuline qui est en mesure de se lier spécifiquement à une protéine contenant une région variable de chaîne κ d'immunoglobuline et qui possède une stabilité chimique élevée à, en particulier, des solutions alcalines ; une matrice de séparation par affinité possédant le peptide en tant que ligand ; et un procédé de production d'une protéine contenant une région variable de chaîne κ à l'aide de la matrice de séparation par affinité. Un autre objectif de la présente invention est de fournir : un ADN codant pour le peptide susmentionné ; un vecteur contenant cet ADN ; et un transformant transformé par le vecteur. Ces problèmes sont résolus par l'utilisation, en tant que ligand d'affinité, d'un peptide obtenu par l'introduction d'une mutation dans un site approprié du domaine de liaison à une région variable de chaîne κ d'une protéine L issue d'une souche de Peptostreptococcus magnus. 本発明は、免疫グロブリンκ鎖可変領域含有タンパク質に特異的に結合し、かつ、特にアルカリ溶液に対する化学的安定性に優れた、免疫グロブリンκ鎖可変領域結合性ペプチド、当該ペプチドをリガンドとして有するアフィニティ分離マトリックス、および当該アフィニティ分離マトリックスを用いたκ鎖可変領域含有タンパク質の製造方法を提供することを目的とする。また、本発明は、当該ペプチドをコードするＤＮＡ、当該ＤＮＡを含むベクター、および当該ベクターにより形質転換された形質転換体を提供することも目的とする。ペプトストレプトコッカス・マグヌス株由来プロテインＬのκ鎖可変領域結合ドメインに対して、適切な部位に変異を導入したペプチドをアフィニティ・リガンドとして利用することで、上記課題を解決する。