KDAC VARIANTS AND USES THEREOF

• Main Authors: NEUMANN, Heinz, SPINCK, Martin
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 28.03.2019
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The invention provides a method of selecting a mutant polypeptide having lysine demodification, in particular lysine deacylation, activity, wherein the method comprises the following steps (a) incubating a mutant polypeptide having an amino acid sequence with at least 80% sequence identity to SEQ ID NO: 1 with a peptide or polypeptide comprising an inactivated essential lysine residue; and (b) determining the activity of the mutant polypeptide to activate the peptide or polypeptide comprising the inactivated essential lysine residue, wherein the mutant polypeptide and the peptide or polypeptide comprising an inactivated essential lysine residue are incubated in a biological cell. The invention furthermore relates to an acylated luciferase, particularly Firefly luciferase, and uses thereof. The present invention furthermore relates to a mutant polypeptide comprising an amino acid sequence having at least 98% sequence homology with SEQ ID NOs: 2, 3, 4, 5 or 6 and having lysine demodification, in particular lysine deacylation, activity, wherein the mutant polypeptide is not identical to SEQ ID NO: 1. The invention also relates to the mutant polypeptide of the invention and a peptide or polypeptide comprising an inactivated essential lysine residue for use in treating cancer. La présente invention concerne un procédé de sélection d'un polypeptide mutant présentant une démodification lysine, en particulier de déacylation lysine, l'activité, le procédé comprenant les étapes suivantes (a) incubation d'un polypeptide mutant ayant une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 % d'identité de séquence avec SEQ ID no : 1 avec un peptide ou un polypeptide comprenant un résidu lysine essentiel inactivé; et (b) la détermination de l'activité du polypeptide mutant pour activer le peptide ou le polypeptide comprenant le résidu lysine essentiel inactivé, le polypeptide mutant et le peptide ou le polypeptide comprenant un résidu lysine essentiel inactivé étant incubés dans une cellule biologique. L'invention concerne en outre une luciférase acylée, particulièrement luciférase de luciole, et ses utilisations. La présente invention concerne en outre un polypeptide mutant comprenant une séquence d'acides aminés ayant au moins 98 % d'homologie de séquence avec SEQ ID nos : 2, 3, 4, 5 ou 6 et ayant une démodification lysine, en particulier de déacylation lysine, l'activité, le polypeptide mutant n'étant pas identique à SEQ ID no : 1. L'invention concerne également le polypeptide mutant de l'invention et un peptide ou polypeptide comprenant un résidu lysine essentiel inactivé pour l'utilisation dans le traitement du cancer.