VIRUS TEST METHOD AND VIRUS TEST KIT

Provided are a method and a kit with which it is possible to detect the presence of RNA of a non-enveloped virus by addition to a reaction solution and one-step RT-PCR without isolation of the RNA from a sample or advance heat treatment of the sample. A method for testing whether or not a virus is p...

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Main Author TERAUCHI, Kenta
Format Patent
LanguageEnglish
French
Japanese
Published 01.11.2018
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Summary:Provided are a method and a kit with which it is possible to detect the presence of RNA of a non-enveloped virus by addition to a reaction solution and one-step RT-PCR without isolation of the RNA from a sample or advance heat treatment of the sample. A method for testing whether or not a virus is present, the method comprising the following steps (1) to (3). (1) A step for mixing a sample and a reagent that contains a polar organic solvent. (2) A step for adding a one-step RT-PCR reaction solution that contains reverse transferase and DNA polymerase, or DNA polymerase having reverse transcription activity, to the mixed solution. (3) A step for performing a one-step RT-PCR reaction after sealing the reaction vessel. La présente invention concerne un procédé et un kit au moyen desquels il est possible de détecter la présence d'ARN d'un virus non enveloppé par addition d'une solution réactionnelle de RT-PCR en une étape, sans isolement de l'ARN d'un échantillon ni traitement thermique préalable de l'échantillon. L'invention concerne également un procédé permettant d'analyser si un virus est présent ou non, le procédé comprenant les étapes suivantes (1) à (3). (1) Une étape de mélange d'un échantillon et d'un réactif qui contient un solvant organique polaire. (2) Une étape d'addition d'une solution réactionnelle de RT-PCR en une étape qui contient une transférase inverse et une ADN polymérase, ou une ADN polymérase présentant une activité de transcription inverse, sur la solution mixte. (3) Une étape d'exécution d'une réaction de RT-PCR en une étape après scellement du récipient réactionnel. 試料からRNAの単離や試料の事前の加熱処理を行うことなく、反応液に加え、1ステップRT-PCRにより非エンベロープウイルスのRNAの有無の検出を可能とする方法およびキットを提供する。 以下の(1)から(3)の工程からなるウイルスの存在の有無を検査するための方法。(1)試料と極性有機溶媒を含む試薬を混合する工程、 (2)前記混合液に逆転写酵素およびDNAポリメラーゼ、または逆転写活性を有するDNAポリメラーゼを含む1ステップRT-PCR反応液を添加する工程、 (3)反応容器を密閉後、1ステップRT-PCR反応を実施する工程。
Bibliography:Application Number: WO2018JP14068