CELL PRODUCT OF MAMMALIAN INSULIN-PRODUCING CELLS AND METHODS FOR USING THE SAME

• Main Authors: PETRAKOVA, Olga Sergeevna, VASILIEV, Andrey Valentinovich, BORISOV, Mikhail Aleksandrovich, VOROTELYAK, Ekaterina Andreevna, GVAZAVA, Inessa Givievna, ROGOVAYA, Olga Sergeevna
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 27.09.2018
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The technical result of the invention is to simplify the technology of obtaining insulin-producing cells, obtaining at least 70% of functionally active insulin-producing cells in cell culture, that underwent differentiation. The method comprises obtaining epithelial progenitor cells and their subsequent differentiation into pancreatic cells, capable to glucose-sensitive insulin secretion in which pancreatic differentiation is performed in two stages: (a) at the first stage cells are differentiated within 4-15 days in a culture medium containing at least serum of a mammal, glutamine, epidermal growth factor, transferrin, sodium selenite, retinoic acid, isoproterenol; (b) at the second stage, cells are differentiated within 4-15 days in a culture medium containing at least serum of a mammal, glutamine, epidermal growth factor, retinoic acid, nicotinamide, hepatocyte growth factor, dexamethasone; moreover, the cultivation in both stages is carried out in gas atmosphere of 5% CO2 at 37°C. Group of inventions includes cell product of insulin-producing cells of a mammal, and a method of differentiation of pancreatic epithelial progenitor cells of mammals, including humans, as well as a method for replacement therapy of diabetes mellitus using cell product. L'invention concerne le résultat technique de la simplification de la technologie d'obtention de cellules productrices d'insuline, permettant d'obtenir au moins 70 % de cellules productrices d'insuline fonctionnellement actives en culture cellulaire, qui ont subi une différenciation. Le procédé comprend l'obtention de cellules progénitrices épithéliales et leur différenciation ultérieure en cellules pancréatiques, capables de sécrétion d'insuline sensible au glucose dans lesquelles la différenciation pancréatique est réalisée en deux étapes : (a) durant la première étape, les cellules sont différenciées en 4 à 15 jours dans un milieu de culture contenant au moins du sérum d'un mammifère, de la glutamine, le facteur de croissance épidermique, de la transferrine, du sélénite de sodium, de l'acide rétinoïque, de l'isoprotérénol; (b) durant la seconde étape, les cellules sont différenciées en 4-15 jours dans un milieu de culture contenant au moins du sérum d'un mammifère, de la glutamine, le facteur de croissance épidermique, de l'acide rétinoïque, du nicotinamide, le facteur de croissance hépatocytaire, de la dexaméthasone; en outre, la culture dans les deux étapes est réalisée dans une atmosphère gazeuse de 5% de CO2 à 37°C. Le groupe d'inventions comprend un produit cellulaire de cellules productrices d'insuline d'un mammifère, et un procédé de différentiation de cellules progénitrices épithéliales pancréatiques de mammifères, y compris des êtres humains, ainsi qu'un procédé de thérapie de remplacement du diabète sucré au moyen du produit cellulaire.