SENSORS FOR DETECTION AND QUANTIFICATION OF MICROBIOLOGICAL PROTEIN SECRETION

• Main Authors: JURISCHKA, Sarah-Kristin, FREUDL, Roland, BINDER, Stephan, SCHAUMANN, Georg, KLEINE, Britta
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 29.09.2016
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention relates to a cell which is genetically modified with respect to its wild type and which comprises a gene sequence coding for a fluorescent protein, wherein the expression of the fluorescent protein depends on the amount of protein that is secreted across the cytoplasmic membrane into the extracytosolic space. The present invention also relates to a method for the identification of a cell having an increased secretion of protein across the cytoplasmic membrane into the extracytosolic space, a method for the identification of a culture medium composition that is optimized for the recombinant production of protein, a method for the identification of culture conditions that are optimized for the recombinant production of protein, a method for the identification of a compound that is characterized by an antibiotic activity due to its property to damage the membrane of a bacterial cell or to analyse the effect of such a compound on a population of genetically different bacterial cells or genetically identical cells in different physiological states or different growths phases, a method for the production of a cell which is genetically modified with respect to its wild type with optimized secretion of protein across the cytoplasmic membrane into the extracytosolic space, a cell obtained by this method, a method for the production of proteins and a method for the preparation of a mixture. La présente invention concerne une cellule génétiquement modifiée par rapport à son type sauvage et qui comprend une séquence de gène codant pour une protéine fluorescente, l'expression de la protéine fluorescente dépendant de la quantité de protéine qui est sécrétée à travers la membrane cytoplasmique dans l'espace extracytosolique. La présente invention concerne également un procédé pour l'identification d'une cellule présentant une sécrétion accrue de protéines à travers la membrane cytoplasmique dans l'espace extracytosolique, un procédé pour l'identification d'une composition de milieu de culture qui est optimisée pour la production recombinante de protéine, un procédé pour l'identification de conditions de culture qui sont optimisées pour la production recombinante de protéine, un procédé pour l'identification d'un composé qui est caractérisé par une activité antibiotique due à sa propriété pour endommager la membrane d'une cellule bactérienne ou pour analyser l'effet dudit composé sur une population de cellules bactériennes génétiquement différentes ou de cellules génétiquement identiques dans différents états physiologiques ou différentes phases de croissance, un procédé pour la production d'une cellule qui est modifiée génétiquement par rapport à son type sauvage présentant une sécrétion optimisée de protéine à travers la membrane cytoplasmique dans l'espace extracytosolique, une cellule obtenue par ce procédé, un procédé pour la production de protéines et un procédé pour la préparation d'un mélange.