IMPROVED β-FRUCTOFURANOSIDASE

• Main Authors: TOCHIO TAKUMI, FUJII TADASHI, ITO YUMI, TAMURA KEISUKE
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 04.02.2016
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

[Problem] To provide an improved β-fructofuranosidase which can produce kestose while preventing the production of nystose and can decompose sucrose while preventing the decomposition of an oligosaccharide. [Solution] An improved β-fructofuranosidase which comprises an amino acid sequence (a) or (b): (a) an amino acid sequence which is produced by introducing an amino acid mutation into an amino acid sequence for a wild-type β-fructofuranosidase which is represented by SEQ ID NO: 2, wherein the amino acid mutation can cause the substitution of a histidine residue (H) located at position-321 as counted from the N-terminal of the amino acid sequence for the wild-type β-fructofuranosidase by a protein-constituting amino acid residue other than a histidine residue (H); and (b) an amino acid sequence which is produced by deleting, substituting, inserting or adding one or several amino acid residues, each of which is different from the amino acid residue into which the amino acid mutation has been introduced, in the amino acid sequence (a), and which has a β-fructofuranosidase activity. Le problème selon l'invention consiste à proposer une β-fructofuranosidase améliorée pouvant produire du kestose tout en empêchant la production de nystose et pouvant décomposer le saccharose tout en empêchant la décomposition d'un oligosaccharide. La solution selon l'invention consiste en une β-fructofuranosidase améliorée comprenant une séquence d'acides aminés (a) ou (b) : (a) une séquence d'acides aminés résultant de l'introduction d'une mutation d'acide aminé dans une séquence d'acides aminés d'une β-fructofuranosidase de type sauvage représentée par SEQ ID NO : 2, dans laquelle la mutation d'acide aminé peut provoquer la substitution d'un résidu d'histidine (H) situé en position 321, comme compté à partir de l'extrémité N-terminale de la séquence d'acides aminés de la β-fructofuranosidase de type sauvage par un résidu d'acide aminé constitutif d'une protéine autre qu'un résidu d'histidine (H); et (b) une séquence d'acides aminés résultant d'une délétion, substitution, insertion ou addition, dans la séquence d'acides aminés (a), d'un ou de plusieurs résidus d'acides aminés, dont chacun est différent du résidu d'acide aminé affecté par la mutation d'acide aminé, ladite séquence d'acides aminés (b) présentant une activité β-fructofuranosidase. 【課題】　ニストースの生成を抑制しつつケストースを生成し、また、オリゴ糖の分解を抑制しつつスクロースを分解できる改良型β－フルクトフラノシダーゼを提供する。 【解決手段】　下記（ａ）または（ｂ）のアミノ酸配列からなる改良型β－フルクトフラノシダーゼ；（ａ）配列番号２に示す野生型β－フルクトフラノシダーゼのアミノ酸配列に対して、Ｎ末端から３２１番目のヒスチジン（Ｈ）をヒスチジン（Ｈ）以外のタンパク質構成アミノ酸に置換するアミノ酸変異を導入したアミノ酸配列、（ｂ）アミノ酸配列（ａ）において、アミノ酸変異が導入されたアミノ酸を除く１もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換、挿入もしくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつβ－フルクトフラノシダーゼ活性を有するアミノ酸配列。