AN INTEGRATED PROCESS FOR THE PRODUCTION OF THERAPEUTICS (HUMAN ALBUMIN, INTRAVENOUS IMMUNOGLOBULINS, CLOTTING FACTOR VIII AND CLOTTING FACTOR IX) FROM HUMAN PLASMA

• Main Authors: VADDE, NEELIMA, KOMATH, UMA DEVI, DUGGINENI, SWAPNA SAGAR, SAMADDAR, MITALI, NUVULA, ASHOK, CHAKRABORTY, ZINIA
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 06.08.2015
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION ORPROCESSING OF GOODS; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PERFORMING OPERATIONS; PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SEPARATION; SPIRITS; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS; TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINSTCLIMATE CHANGE; TRANSPORTING; VINEGAR; WINE

The invention relates to an integrated scheme for fractionation and purification of plasma products (human albumin, intravenous immunoglobulin (IVIG), clotting factor VIII and clotting factor IX) by sequential chromatography and virus reduction steps. The therapeutically administrable protein IVIG has purity levels exceeding 98%, aggregates and dimers at less than 0.2%, Fc function of > 90% and anti-complementary activity of less than 0.5 CH50 per mg of Ig. The distribution of IgG isomers is comparable to the ranges seen in normal plasma. Human albumin for therapeutic use, purified by this integrated scheme has an electrophoretic purity of close to 100%, with monomers exceeding 98%. The levels of aluminium and pre-kallikrein activator are below the detection limit for the respective tests. The Factor IX preparations have a specific activity of ? 200 IU/ mg. The impurity levels of Factor-II, Factor VII, Factor X are at least 10-fold lesser (? 0.5% instead of 5%) and the heparin impurity of ? 0.01 IU (against 0.5 IU limit for this impurity) is 50-fold lesser the specified pharmacopoeial limits. The purification carried out by an all-chromatography scheme, avoids the use of ethanol precipitation in the entire manufacturing process of the said four plasma products. The invention describes an integrated process for purifying four different proteins from human plasma to high therapeutic grade purity levels, with a potential to purify more therapeutic proteins from a given plasma sample by incorporating additional chromatography steps in the sequence. Cette invention concerne un principe intégré de fractionnement et de purification de produits de plasma (albumine humaine, immunoglobuline intraveineuse (IVIg), facteur de coagulation VIII et facteur de coagulation IX) par chromatographie séquentielle et réduction du virus par étapes. La protéine d'IVIg thérapeutiquement administrable a des niveaux de pureté supérieurs à 98 %, des agrégats et des dimères inférieurs à 0,2 %, une fonction Fc > 90 % et une activité anti-complémentaire inférieure à 0,5 CH50 par mg d'Ig. La distribution des isomères IgG est comparable à celle observée dans le plasma normal. L'albumine humaine à usage thérapeutique, purifiée selon ce procédé intégré, a une pureté électrophorétique proche de 100 %, avec plus de 98 % de monomères. Les niveaux d'aluminium et d'activateur pré-kallikréine sont au-dessous de la limite de détection pour leurs dosages respectifs. Les préparations de facteur IX ont une activité spécifique de 200 IU/mg. Les niveaux d'impureté du facteur II, du facteur VII, du facteur X sont au moins 10 fois inférieurs (0,5 % au lieu de 5 %) aux limites spécifiées dans la pharmacopée et l'impureté de l'héparine qui est de 0,01 IU (contre limite de 0,5 IU pour cette impureté) est 50 fois inférieure à ces mêmes limites. La purification effectuée selon un principe 100 % chromatographique évite l'utilisation de la précipitation à l'éthanol dans tout le processus de fabrication de ces quatre produits de plasma. L'invention concerne un procédé intégré de purification de quatre protéines différentes provenant du plasma humain à des niveaux de pureté de qualité thérapeutique élevés, et a le potentiel pour purifier d'autres protéines thérapeutiques provenant d'un échantillon de plasma donné par incorporation d'étapes de chromatographie supplémentaires dans la séquence.