SWITCHABLE CAS9 NUCLEASES AND USES THEREOF

• Main Authors: LIU, David, HU, Johnny
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 05.03.2020
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Some aspects of this disclosure provide compositions, methods, systems, and kits for controlling the activity and/or improving the specificity of RNA-programmable endonucleases, such as Cas9. For example, provided are guide RNAs (gRNAs) that are engineered to exist in an "on" or "off state, which control the binding and hence cleavage activity of RNA-programmable endonucleases. Some aspects of this disclosure provide mRNA- sensing gRNAs that modulate the activity of RNA-programmable endonucleases based on the presence or absence of a target mRNA. Some aspects of this disclosure provide gRNAs that modulate the activity of an RNA-programmable endonuclease based on the presence or absence of an extended DNA (xDNA). L'invention concerne, dans certains aspects, des compositions, des méthodes, des systèmes et des kits permettant de contrôler l'activité et/ou d'améliorer la spécificité d'endonucléases ARN-programmables, par exemple la Cas9. L'invention concerne, par exemple, des ARN guides (ARNg) qui son conçus pour exister à l'état activé ou à l'état désactivé, lesquels contrôlent la liaison et donc l'activité de clivage d'endonucléases ARN-programmables. Dans d'autres aspects, l'invention concerne des ARNg détecteurs d'ARNm qui modulent l'activité d'endonucléases ARN-programmables en fonction de la présence ou de l'absence d'un ARNm cible. Dans d'autres aspects, l'invention concerne des ARNg qui modulent l'activité d'une endonucléase ARN-programmable en fonction de la présence ou de l'absence d'un ADN allongé (ADNx).