SUPPORT FOR ANTIBODY PURIFICATION, MANUFACTURING METHOD FOR SAME, AND APPLICATION FOR SAME

• Main Authors: HIROTA KIYONORI, OTAKA SEIJI, IWAKURA MASAHIRO
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 19.12.2013
• Subjects: CHEMISTRY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PHYSICS; TESTING

The purpose of the present invention is to provide: a support onto which Protein A has been immobilized, the Protein A having a specific amino acid sequence that enables the dissociation of antibodies under mild pH conditions (specifically, pH4.0-5.5) in which many antibodies do not undergo acid modification; and a manufacturing method for the support. An immobilization support (excluding an immobilization support having a monolith structure) onto which a protein is adsorbed by electrostatic interaction, said protein comprising an amino acid sequence represented by general formula R1-R2-R3-R4-R5-R6, and the section of said protein represented by R1-R2-R3 being used for immobilization on the immobilization support (in the formula: the sequence represents a sequence from the amino-terminal side towards the carboxyl-terminal side; the sequence of the R2 part is either a protein A mutant sequence, which is the protein to be immobilized, or a sequence in which 1-3 of said sequences are linked; and the protein A mutant exhibits the characteristics of strongly binding to the antibodies in neutral conditions, and dissociating with the antibodies which were bonded with in the neutral conditions when in mildly acidic conditions in the range of pH4.0-5.5]. L'invention concerne un support sur lequel une protéine A a été immobilisée, la protéine A comprenant une séquence spécifique d'acides aminés qui rend possible la dissociation des anticorps dans des conditions de pH moyen (spécifiquement, pH 4,0-5,5) dans lesquelles de nombreux anticorps ne subissent pas de modification d'acide ; et un procédé de fabrication du support. Un support d'immobilisation (à l'exclusion d'un support d'immobilisation comprenant une structure monolithique) sur lequel une protéine est adsorbée par une interaction électrostatique, la protéine comprenant une séquence d'acides aminés représentée par la formule R1-R2-R3-R4-R5-R6, et la partie de la protéine représentée par la formule R1-R2-R3 étant utilisée pour immobilisation sur le support d'immobilisation (dans la formule : la séquence représente une séquence allant du côté terminaison amino vers le côté terminaison carboxyle ; la séquence de la partie R2 est soit une séquence mutante de la protéine A qui est la protéine à immobiliser, soit une séquence dans laquelle 1 à 3 des séquences sont liées ; le mutant de protéine A présente les caractéristiques d'une liaison forte aux anticorps dans des conditions neutres, et d'une dissociation des anticorps qui ont été liés dans des conditions neutres lorsque dans des conditions acides faibles dans la plage de pH comprise entre 4,0-5,5].