THERMOSTABLE BIOCATALYST COMBINATION FOR NUCLEOSIDE SYNTHESIS

• Main Authors: DERONCELE THOMAS, VICTOR, MANUEL, CASTELLS BOLIART, JOSEP, PASCUAL GILABERT, MARTA, ESTEVEZ COMPANY, CARLOS, MONTILLA AREVALO, RAFAEL, LOPEZ GOMEZ, CRISTINA
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 30.06.2011
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention relates to a recombinant expression vector comprising: a) the sequence encoding a purine nucleoside phosphorylase (PNPase, E. C. 2.4.2.1), b) the sequence encoding a uridine phosphorylase (UPase, E. C. 2.4.2.3), c) or both; each of the sequences operably linked to one or more control sequences that direct the production of said phosphorylases in a suitable expression host; said sequences originating from the Archaea Thermoprotei class, characterized in that the PNPase is from Sulfolobus solfataricus (SEQ ID NO. 7) and the UPase is from Aeropyrum pernix (SEQ ID NO. 8). In addition, the present invention relates to A transglycosylation method between a sugar-donating nucleoside and an acceptor base in the presence of phosphate ions, characterised in that said method comprises the use of a uridine phosphorylase (UPase) of Aeropyrum pernix (NC_000854.2), a purine nucleoside phosphorylase (PNPase) of Sulfolobus solfataricus (NC_002754.1), or a combination thereof. Cette invention concerne un vecteur d'expression recombinant comprenant : a) la séquence codant pour une purine nucléoside phosphorylase (PNPase, E. C. 2.4.2.1), b) la séquence codant pour une uridine phosphorylase (UPase, E. C. 2.4.2.3), c) ou les deux; chacune des séquences étant liée fonctionnellement à une ou plusieurs séquences de commande qui dirigent la production desdites phosphorylases chez un hôte d'expression approprié; lesdites séquences provenant de la classe des Archaea Thermoprotei, et étant caractérisées en ce que la PNPase est issue de Sulfolobus solfataricus (SEQ ID N°: 7) et en ce que l'UPase est issue d'Aeropyrum pernix (SEQ ID N°: 8). De plus, cette invention concerne un procédé de transglycosylation entre un nucléoside donneur de sucre et une base accepteur en présence d'ions phosphate, caractérisé en ce que ledit procédé comprend l'utilisation d'une uridine phosphorylase (UPase) issue d'Aeropyrum pernix (NC_000854.2), d'une purine nucléoside phosphorylase (PNPase) issue de Sulfolobus solfataricus (NC_002754.1), ou d'une combinaison de celles-ci.