INTEGRATED SAMPLE PREPARATION AND AMPLIFICATION FOR NUCLEIC ACID DETECTION FROM BIOLOGICAL SAMPLES

• Main Author: NASARABADI, SHANAVAZ L
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 28.04.2011
• Subjects: APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Beads are used to perform both a sample preparation and amplification process within a single processing chamber. A fluid sample including a plurality of cells is introduced into a processing chamber already including a plurality of beads. The plurality of cells are lysed within the processing chamber, and nucleic acid released from the lysed cells binds to the beads. The beads are retained in the processing chamber while the lysing reagents are removed. Amplification reagents are added to the processing chamber and an amplification process is performed on the contents of the processing chamber. Amplification of the captured nucleic acid is performed while the nucleic acid is still bound to the beads. During the amplification process, the nucleic acid bound to the beads is amplified. Real-time or end-point detection can be performed on the content of the processing chamber to detect the presence of amplified product. Des perles sont utilisées pour réaliser à la fois un procédé de préparation et d'amplification d'échantillon dans une chambre de traitement unique. Un échantillon de fluide comprenant une pluralité de cellules est introduit dans une chambre de traitement comprenant déjà une pluralité de perles. La pluralité de cellules sont lysées dans la chambre de traitement, et l'acide nucléique libéré par les cellules lysées se lie aux perles. Les perles sont maintenues dans la chambre de traitement alors que les réactifs de lyse sont éliminés. Des réactifs d'amplification sont ajoutés dans la chambre de traitement et un procédé d'amplification est réalisé sur le contenu de la chambre de traitement. L'amplification de l'acide nucléique capturé est réalisée alors que l'acide nucléique est toujours lié aux perles. Pendant le procédé d'amplification, l'acide nucléique lié aux perles est amplifié. Une détection en temps réel ou de point final peut être réalisée sur le contenu de la chambre de traitement pour détecter la présence du produit amplifié.