ANTIGENIC CHIMERIC TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS/DENGUE VIRUS TYPE 4 RECOMBINANT VIRUSES

• Main Authors: ENGEL, AMBER, R, PLETNEV, ALEXANDER, G, MURPHY, BRIAN, R
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 28.04.2011
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Disclosed herein are chimeric TBEV/DEN4 flaviviruses including a first nucleic acid molecule including a 5' non-coding region (NCR) from a DEN4 virus, a nucleic acid encoding a C protein and non-structural proteins from a DEN4 virus, and a 3' NCR from a DEN4 virus, wherein nonstructural protein NS4B includes a phenylalanine at amino acid position 112, nonstructural protein NS5 includes an alanine at amino acid position 654 and an alanine at amino acid position 655, and the 3' NCR includes a deletion of nucleotides 10478-10507. The chimeric construct also includes a second nucleic acid molecule, which is operably linked to the first nucleic acid molecule, encoding a prM protein and an E protein from a TBEV, wherein the E protein includes an amino acid substitution that differs from the wild type TBEV at amino acid position 315 and a tryptophan at amino acid position 240. Also disclosed are methods of eliciting an immune response using the disclosed TBEV/DEN4 chimeric flaviviruses and immunogenic compositions including the disclosed chimeric flaviviruses and a pharmaceutically acceptable carrier. La présente invention concerne des flavivirus TBEV/DEN4 chimériques comprenant une première molécule d'acide nucléique qui comporte une région non codante 5' (NCR) d'un virus DEN4, un acide nucléique codant pour une protéine C et des protéines non structurelles de virus DEN4, et une NCR 3' d'un virus DEN4. La protéine non structurelle NS4B comprend une phénylalanine en position d'acide aminé 112, une protéine non structurelle NS5 comprend une alanine en position d'acide aminé 654 et une alanine en position d'acide aminé 655, et la NCR 3' comprend une suppression des nucléotides 10478-10507. La construction chimérique comprend également une seconde molécule d'acide nucléique, qui est liée fonctionnellement à la première molécule d'acide nucléique, codant pour une protéine prM et une protéine E d'un TBEV, ladite protéine E comprenant une substitution d'acide aminé qui diffère du type sauvage TBEV à la position d'acide aminé 315 et un tryptophane à la position d'acide aminé 240. L'invention porte en outre sur des méthodes de provocation d'une réponse immune au moyen des flavivirus chimériques TBEV/DEN4 et des compositions immunogènes de l'invention, comprenant les flavivirus chimériques de l'invention et un vecteur pharmaceutiquement acceptable.