METHOD FOR QUANTIFICATION OF THE DENGUE NS1 ANTIGEN ON AN IMMUNOCHROMATOGRAPHIC STRIP

• Main Authors: GUILLEN NIETO, GERARDO, ENRIQUE, DIAZ ARGUDIN, TAMARA, FERNANDEZ MASSO, JULIO, RAUL, LEMOS PEREZ, GILDA, PALENZUELA GARDON, DANIEL, OCTAVIO, FERNANDEZ DE COSSIO DORTA-DUQUE, MARIA, ELENA, NOVOA PEREZ, LIDIA, INES
• Format: Patent
• Language: English; French; Spanish
• Published: 06.08.2009
• Subjects: GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; PHYSICS; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS; TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE; TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINSTCLIMATE CHANGE; TESTING

The invention relates to one-step instrument-free method for the quantification of the dengue NS1 antigen in early acute phase, present in serum, plasma and blood samples, by reacting same with a specific monoclonal and/or polyclonal antibody against the antigen, which antibodies are conjugated to colloidal gold deposited on a matrix from which it is released upon contact with the sample. This immune complex migrates through a solid medium and is trapped upon interaction with other specific antibodies against epitopes of the antigen for the four serotypes of the virus which are firmly bound to a reactive zone of the medium. The immune complex is deposited in the reaction area which is manifested by the appearance of a visually detectable mark which depending on the colour thereof indicates a positive result in response to the presence of the NS1 antigen and consequently a dengue virus infection. Procedimiento no instrumental de un solo paso para la cuantificación del antígeno de dengue NS1 en fase aguda temprana, presente en muestras de suero, plasma o sangre, a través de su reacción con un anticuerpo específico monoclonal y/o policlonal contra el antígeno conjugados a oro coloidal, que se encuentra depositado sobre una matriz de la que es liberado al ponerse en contacto con la muestra. Este inmunocomplejo migra a través de un soporte sólido y es atrapado al interactuar con otros anticuerpos específicos contra epítopes del antígeno, para los cuatro serotipos del virus, que se encuentran firmemente unidos a una zona reactiva del soporte. El inmunocomplejo se deposita en el área de reacción, que se evidencia por la aparición de una marca visualmente detectable que según el color, indica un resultado positivo a la presencia del antígeno NS1 y por tanto una infección por virus de dengue. L'invention porte sur un procédé non instrumental en une étape qui permet de quantifier l'antigène NS1 de la dengue en phase aigüe précoce dans des échantillons de sérum, de plasma ou de sang, sur la base de la réaction dudit antigène avec un anticorps monoclonal et/ou polyclonal spécifique dirigé contre l'antigène, anticorps qui est conjugué à de l'or colloïdal et déposé sur une matrice dont il se libère lors de sa mise en contact avec l'échantillon. L'immunocomplexe formé migre alors à travers un support solide et se retrouve piégé au moment où il entre en interaction avec d'autres anticorps spécifiques dirigés contre les épitopes de l'antigène pour les quatres sérotypes du virus, lesquels anticorps se trouvent fermement liés à une zone réactive du support. L'immunocomplexe se dépose dans la zone de réaction, la réaction étant mise en évidence par l'apparition d'une marque visuellement détectable qui indique, selon sa couleur, un résultat positif à la présence de l'antigène NS1 et, par conséquent, une infection par le virus de la dengue.