MICROFLUIDIC METHOD AND SYSTEM FOR ENZYME INHIBITION ACTIVITY SCREENING

• Main Authors: DETTLOFF, ROGER, HUANG, ESTHER, GERBER, RAPHAELE, FARINAS, JAVIER, A, HACKER, COLEEN, DUNNE, JUDE, A, TRINH, THI NGOC VY, KAZAKOVA, IRINA, G
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 12.03.2009

Methods for screening a compound for enzyme inhibition activity include providing at least one sample mixture to a microfluidic device, applying vacuum pressure to the sample mixture, flowing the sample mixture along a microchannel of the microfluidic device, separating at least two components of the sample mixture based upon a net charge difference between the product and at least one other material to produce separated material, detecting at least one of the separated materials, and determining enzyme inhibition activity based on the detection of the separated material. Kits for screening a compound for enzyme inhibition activity include a first multiwell plate 150 having a specific plurality of enzymes disposed within a first plurality of wells and a second multiwell plate 160 having a plurality of enzyme substrates disposed with a second plurality of wells, a phosphate source 162 and a cofactor 164 disposed within each well of the second plate. La présente invention concerne des procédés de criblage d'un composé à la recherche d'une activité d'inhibition enzymatique comprenant l'alimentation d'un dispositif microfluidique en au moins un échantillon mixte, l'application d'une pression sous vide à l'échantillon mixte, la circulation de l'échantillon mixte le long d'un microcanal du dispositif microfluidique, la séparation d'au moins deux composants de l'échantillon mixte sur la base d'une différence de charges nette entre le produit et au moins un autre matériau afin d'obtenir un matériau séparé, la détection d'au moins l'un des matériaux séparés et la détermination de l'activité d'inhibition enzymatique sur la base de la détection du matériau séparé. Des nécessaires de criblage d'un composé à la recherche d'une activité d'inhibition enzymatique comprennent une première plaque multipuits 150 comportant une pluralité d'enzymes spécifiques disposées au sein d'une première pluralité de puits et une seconde plaque multipuits 160 comportant une pluralité de substrats enzymatiques disposés au sein d'une seconde pluralité de puits, ainsi qu'une source de phosphate 162 et un cofacteur 164 déposés dans chaque puits de la seconde plaque.