METHOD FOR PRODUCING TARGET PROTEINS USING AMINO ACIDS AND PYRUVIC ACIDS IN CULTURE OF PLANT CELLS

• Main Authors: LEE, SONG-JAE, PARK, CHEON-IK, LIM, SANG-MIN, RYU, WUK-SANG, JUNG, HAHN-SUN, TAN, HYUN-KWANG, KANG, SEUNG-HOON, KIM, DONG-IL, KIM, SANG-LIN
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 03.04.2008
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Provided is a method for producing a target protein via cultivation of transgenic plant cells comprising a promoter capable of expressing the protein under sugar-free conditions or in response to the depletion of sugar and a gene encoding the target protein, without exchange of a cell growth medium with a sugar-depleted medium. The method comprises 1 ) culturing transgenic plant cells in a sugar-rich medium to grow plant cells; and 2) culturing the transgenic plant cells with addition of an amino acid mixture to the culture of Step 1 without exchange of a cell growth medium with a sugar-depleted medium, thereby expressing a target protein. The method of the present invention enables commercial-scale production of recombinant proteins via establishment of optimized culture conditions by addition of an amino acid mixture to induce protein expression without exchange of a cell growth medium with a sugar- free medium, and addition of pyruvic acid during the induction period of protein expression to thereby enhance the production yield of target proteins. L'invention concerne un procédé de production de protéine cible via la culture de cellules végétales transgéniques comprenant un promoteur capable d'exprimer cette protéine dans des conditions exemptes de sucre ou en réponse à la déplétion de sucre et un gène codant pour cette protéine cible, sans échange de milieu de croissance de cellules avec un milieu pauvre en sucre. Ce procédé comprend : 1) la cultures de cellules végétales transgéniques dans un milieu riche en sucre de façon à faire croître des cellules végétales et, 2) la culture de cellules végétales transgéniques avec l'addition d'un mélange d'acides aminés à la culture de l'étape 1 sans échange de milieu de croissance de cellules avec un milieu pauvre en sucre, exprimant ainsi une protéine cible. Le procédé de la présente invention permet la production à l'échelle commerciale de protéines recombinantes via l'établissement de conditions de culture optimisées par l'addition d'un mélange d'acides aminés destiné à induire l'expression de protéines sans échange de milieu de croissance cellulaire avec un milieu sans sucre, et l'addition d'acide pyruvique pendant la période d'induction de l'expression de protéines afin de renforcer le rendement de production de protéines cible.