TRPM5 BASED ASSAYS AND THE USE THEREOF FOR THE IDENTIFICATION OF MODULATORS OF SWEET, BITTER OR UMAMI (SAVORY) TASTE

• Main Authors: DITSCHUN, TANYA, RAY, SUMITA, PATRON, ANDREW, CHEN, QING, WILLIAMS, MARK, SERVANT, GUY, DAHAN, DAVID, KAMDAR, POONIT, PATRON, ANDREW, P, MOYER, BRYAN, LIGANI, AMY
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 31.12.2008
• Subjects: CHEMISTRY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PHYSICS; TESTING

Robust cell based assays are provided that use cells that express wild-type or modified TRPM5 nucleic acid sequences in order to identify putative taste modulators, preferably sweet, bitter and umami taste modulators. The preferred assays use HEK-293 cells that express TRPM5, optionally at least one GPCR, preferably a taste specific GPCR, and a G protein that couples therewith. These assays detect TRPM5 modulators by use of membrane potential dyes that emit fluorescence on changes in TRPM5 activity based on changes in membrane potential and these changes in fluorescence are detectable using Fluorimetric Imaging Plate Readers (FLIPR). L'invention concerne des épreuves biologiques fondées sur des cellules robustes. Ces épreuves font appel à des cellules qui expriment des séquences d'acide nucléique de TRPM5 modifiées ou de type sauvage, de sorte à identifier des modulateurs de goût putatifs, de préférence des modulateurs de goût sucré, amer et umami. Les épreuves biologiques préférées de l'invention font appel à des cellules HEK293 qui expriment TRPM5, éventuellement à au moins un RCPG; de préférence un GPCR spécifique au goût, et une protéine G qui se lie à ce dernier. Ces épreuves permettent de détecter des modulateurs de TRPM5 en faisant appel à des colorants de potentiel membranaire qui émettent une fluorescence lors de changements de l'activité de TRPM5, en fonction de changements se produisant au niveau du potentiel membranaire et de la fluorescence détectables à l'aide d'un lecteur de plaque d'imagerie fluorimétrique (FLIPR).