BETA-CASEIN GENE TARGETING VECTOR USING HOMOLOGOUS RECOMBINATION

• Main Authors: HAN, YONG-MAHN, KOO, DEOG-BON, CHANG, MIRA, LEE, KYUNG-KWANG
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 01.06.2006
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention relates to a beta-casein gene targeting vector comprising (1) a first region having a length of 5 to 12 kb which is homologous to the promoter and its flanking nucleic acid sequences of beta-casein gene; (2) a region for cloning a nucleic acid coding for desired proteins; (3) a region for coding a positive selection marker; (4) a second region having a length of 2 to 4 kb which is homologous to the nucleic acid sequences of beta-casein gene; wherein the nucleic acid segment corresponding to the first region is located upstream to the nucleic acid segment corresponding to the second region in the 5'-3' arrangement of beta-casein gene, animal cells which are gene-targeted with the said vector and embryos which are nuclear-transferred with the said animal cells. The present invention also relates to a method for obtaining a desired protein from the milk of transgenic animal which is prepared by implanting the said embryos. L'invention concerne un vecteur ciblant le gène de la bêta-caséine qui comprend (1) une première région ayant une longueur de 5 à 12 kb qui est homologue au promoteur et à ses séquences flanquantes d'acide nucléique du gène de la bêta-caséine ; (2) une région permettant de cloner un codage d'acide nucléique pour des protéines voulues ; (3) une région permettant de coder un marqueur de sélection positive ; (4) une seconde région ayant une longueur de 2 à 4 kb qui est homologue aux séquences d'acide nucléique du gène de la bêta-caséine ; le segment d'acide nucléique correspondant à la première région étant situé en amont du segment d'acide nucléique correspondant à la seconde région dans la disposition 5'-3' du gène de la bêta-caséine, des cellules animales qui sont ciblées sur le gène conjointement avec ledit vecteur et des embryons qui dont le noyau est transféré conjointement avec lesdites cellules animales. L'invention concerne également une méthode permettant d'obtenir une protéine voulue à partir du lait de l'animal transgénique qui est préparé par implantation desdits embryons.