PROCESS FOR PURIFYING INTERFERON BETA

• Main Authors: PARK, JI-SOOK, BAEK, MIN-JI, PARK, HYUNG-KI, LEE, DONG-EOK, OH, MYUNG-SUK, KIM, KI-WAN, CHUNG, JONG-SANG, AHN, JEE-WON
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 16.06.2005
• Edition: 7
• Subjects: CHEMISTRY; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES

Provided is a process for purifying human interferon beta from a recombinant human interferon beta-containing culture comprising performing affinity chromatography and reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC), wherein the affinity chromatography includes: adsorbing the interferon beta-containing culture to an equilibrated affinity chromatography column, followed by washing with an equilibration buffer solution; washing the column with a washing buffer solution A of pH 6.5-7.5 containing 30-60 wt% of propylene glycol and a washing buffer solution B of pH 6.5-7.5 containing 10-30 wt% of propylene glycol and 1-2M NaCl; and eluting a human interferon beta-containing fraction with a buffer solution of pH 6.5-7.5 containing 40-60 wt% of propylene glycol and 1-2M NaCl. L'invention concerne un procédé destiné à purifier un interféron bêta humain à partir d'une culture contenant un interféron bêta humain recombiné. Ce procédé consiste à réaliser une chromatographie d'affinité et une chromatographie liquide haute performance en phase inversée (RP-HPLC). La chromatographie d'affinité consiste à adsorber la culture contenant un interféron bêta vers une colonne de chromatographie d'affinité équilibrée, puis à réaliser un lavage avec une solution tampon d'équilibrage, à laver la colonne avec une solution tampon de lavage (A) présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 30 et 60 % en poids de propylène glycol et une solution tampon de lavage (B) présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 10 et 30 % en poids de propylène glycol et entre 1 et 2 M de NaCl, et à éluer une fraction contenant un interféron bêta humain avec une solution tampon présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 40 et 60 % en poids de propylène glycol et entre 1 et 3 M de NaCl.