RAPID METHOD OF SELECTING CELLS FOR GENE DISRUPTION BY HOMOLOGOUS RECOMBINATION

• Main Authors: BURGESS, ROBERT, M., JR, SCHNEIDER, PATRICK, A
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 24.07.2003
• Edition: 7
• Subjects: AGRICULTURE; ANIMAL HUSBANDRY; BEER; BIOCHEMISTRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FISHING; FORESTRY; HUMAN NECESSITIES; HUNTING; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; NEW BREEDS OF ANIMALS; NEW PLANTS OR PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PHYSICS; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; SPIRITS; TESTING; TRAPPING; VINEGAR; WINE

Procedures and vectors are provided for the specific alteration of particular genetic loci in eukaryotic cells. One procedure comprises the utilization of ATG-minus fluorescent protein gene targeting (AMFP) DNA vectors for the purpose of creating and identifying cells which have vector sequences integrated into the host cell genome via site-specific homologous recombination. The procedure also comprises the utilization of sequences encoding in vivo detactable markers for the identification of cells which have exogenous vector sequences integrated into the genome of the host cell, either via site-specific homologous recombination or nonhomologous recombination or insertion. The invention also includes vectors for creating modifications in eukaryotic cells. In addition, the invention includes cells and organisms generated from cells with specific genetic alterations through the implementation and use of provided procedures and vectors. L'invention concerne des procédés et des vecteurs d'altération spécifique de loci particuliers du gène dans des cellules eucaryotes. Un de ces procédés consiste à utiliser des vecteurs d'ADN de ciblage du gène de la protéine fluorescente verte ATG-moins (AMFP) aux fins de créer et d'identifier des cellules dont des séquences de vecteurs sont incorporées dans le génome de la cellule hôte par recombinaison homologue spécifique du site. Les procédés de l'invention consistent également à utiliser des séquences codant in vivo des marqueurs décelables, pour l'identification de cellules dont des séquences de vecteurs exogènes sont incorporées dans le génome de la cellule hôte, soit par recombinaison homologue spécifique du site, soit par recombinaison non homologue soit encore par insertion. L'invention concerne aussi des vecteurs pouvant provoquer des modifications dans des cellules eucaryotes. Elle concerne en outre des cellules et des organismes produits à partir de cellules présentant des altérations génétiques spécifiques, par la mise en oeuvre et l'utilisation des procédés et vecteurs de l'invention.