METHOD FOR THE IN VITRO SYNTHESIS OF SHORT DOUBLE STRANDED RNAs

• Main Authors: HARRIS, ADAM, N, DE BACKER, MARIANNE, DENISE
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 15.05.2003
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention relates to the field of synthesis of short double-stranded RNAs. An in vitro transcription method using bacteriophage polymerases and target sequence-specific single-stranded DNA oligonucleotides as templates is disclosed. The present invention finds particularly advantageous use in the synthesis of short interfering RNAs (siRNAs) that have been shown to function as key intermediates in triggering sequence-specific RNA degradation during posttranscriptional gene silencing in plants and RNA interference in invertebrates and vertebrate systems. L'invention concerne le domaine de la synthèse de brins d'ARN bicaténaire courts. L'invention concerne un procédé de transcription in vitro faisant appel à des polymérases bactériophages et à des oligonucléotides d'ADN monocaténaire spécifique à une séquence cible, en tant que modèles. L'invention permet de faire appel de manière particulièrement avantageuse à la synthèse de brins d'ARN d'interférence courts (ARNsi), s'avérant fonctionner en tant qu'intermédiaires clés dans le déclenchement de la dégradation d'ARN spécifique à une séquence lors du silençage génique post-transcriptionnel chez des végétaux et d'interférence d'ARN dans des systèmes invertébrés et vertébrés.