METHOD OF SCREENING MULTIPLY TRANSFORMED CELLS USING BICISTRONIC EXPRESSION OF FLUORESCENT PROTEINS

• Main Authors: GRAY, PETER, PHILIP, SUNSTROM, NOELLE-ANNE, GAY, ROBERT, D
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 31.05.2001
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PHYSICS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; TESTING; VINEGAR; WINE

A method of screening multiply transformed/transfected cells to identify those cells expressing at least two peptides or proteins of interest. The method comprising: 1. Simultaneously or sequentially transforming a cell with at least two different expression cassettes in which the gene of interest is linked via an IRES to a fluorescent marker gene. Each marker gene is different. 2. Providing conditions in which expression of the genes will occur. 3. Identifying cells expressing proteins by detecting the different fluorescent signals. L'invention concerne un procédé de criblage de cellules transformées/transfectées plusieurs fois, afin d'identifier les cellules exprimant au moins deux peptides ou protéines d' intérêt. Le procédé consiste à transformer simultanément ou séquentiellement une cellule au moyen d'au moins deux cassettes d'expression différentes dans lesquelles le gène d'intérêt est lié via une séquence IRES à un gène marqueur fluorescent. Chaque gène marqueur est différent. Le procédé consiste ensuite à fournir des conditions dans lesquelles apparaîtra l'expression des gènes, et à identifier des cellules exprimant les protéines en détectant les différents signaux fluorescents.