PRIMER EXTENSION METHODS FOR PRODUCTION OF HIGH SPECIFIC ACTIVITY NUCLEIC ACID PROBES

• Main Authors: JAMES, SHALE, A, BEHLKE, MARK, A, DEVOR, ERIC, J, WALDER, JOSEPH, A
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 10.08.2000
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; ENZYMOLOGY; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention provides novel nucleic acid labeling techniques that generate nucleic acid probes with specific activities at least ten fold higher than the levels obtained using standard labeling methods. Specifically, the methods of the invention provide methods of producing nucleic probes that each comprises multiple labeled nucleotides. The methods can be used to generate RNA, DNA or hybrid probes. The invention also provides reaction mixtures and kits for the practice of the methods of the invention and compositions comprising the probes generated according to the methods of the invention. La présente invention concerne des techniques de marquage d'acides nucléiques qui permettent de générer des sondes nucléiques avec des activités spécifiques au moins dix fois supérieures aux niveaux obtenus avec des techniques standards de marquage. Spécifiquement, les techniques de l'invention permettent de produire des sondes nucléiques qui comprennent chacune de multiples nucléotides marqués. Ces techniques peuvent être utilisées afin de produire des sondes ARN, ADN ou hybrides. L'invention permet aussi d'obtenir des mélanges de réaction et des nécessaires prêts à l'emploi permettant la pratique des techniques de l'invention, ainsi que des compositions contenant les sondes produites selon les techniques de l'invention.