DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR PORCINE CIRCOVIRUS

• Main Authors: Kryukova Elena Nikolaevna, Samujlenko Anatolij Yakovlevich, Emelyanov Ilya Alekseevich, Melnik Roman Nikolaevich, Fedorova Natalya Vladimirovna, Bogomolova Olesya Anatolevna, Fedorova Olga Yurevna, Majstrenko Evgeniya Semenovna, Litenkova Irina Yurevna, Popova Vera Mikhajlovna, Bondareva Natalya Anatolevna, Markova Evgeniya Vladimirovna, Preobrazhenskaya Anastasiya Sergeevna, Pukhova Nina Mikhajlovna, Klyukina Valentina Ivanovna, Kruglov Aleksandr Aleksandrovich, Ivanov Igor Viktorovich, Grin Svetlana Anatolevna, Babina Ekaterina Aleksandrovna, Lavrov Egor Sergeevich, Fedorov Yurij Nikolaevich, Gadzhimuradov Oskar Alikhaevich, Chernykh Oleg Yurevich, Melnik Nikolaj Vasilevich, Matveeva Irina Nikolaevna
• Format: Patent
• Language: English; Russian
• Published: 21.08.2019
• Subjects: INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; PHYSICS; TESTING

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to the field of biotechnology and veterinary virology and represents a diagnostic technique for porcine circovirus including cell culture RK-15, infection thereof with biological material, fixation of RK-15 cells, incubation serially with specific serums and anti-wit horseradish peroxidase-labeled immunoglobulins and detecting swine circovirus antigen by presence of dark red cell cytoplasm, characterized by that RK-15 cells are fixed for 30-40 minutes in 0.01-0.02 M phosphate-salt buffer with pH 7.2-7.4 containing 1-4 % paraformaldehyde and 0.2-0.4 % nonylphenyl polyethylene glycol, at temperature of 22-24 °C, then sequentially treated for 10-15 minutes with 0.01-0.02 M phosphate-salt buffer with pH 7.2-7.4, containing 0.3-0.4 M glycine and 1-2 % casein, followed by 10-15 minutes 0.3-0.6 % hydrogen peroxide, after which specific polyclonal antibodies are applied.EFFECT: use of the declared method enables rapid and accurate diagnosis of porcine circovirus.1 cl, 11 ex Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии и представляет собой способ диагностики цирковируса свиней, включающий посев культуры клеток РК-15, инфицирование ее биологическим материалом, фиксацию клеток РК-15, инкубирование последовательно со специфическими сыворотками и антисвиными меченными пероксидазой хрена иммуноглобулинами и выявление антигена цирковируса свиней по наличию темно-красного окрашивания цитоплазмы клеток, отличающийся тем, что фиксацию клеток РК-15 проводят в течение 30-40 минут в 0,01-0,02 М фосфатно-солевом буфере с рН 7,2-7,4, содержащем 1-4% параформальдегида и 0,2-0,4% нонилфенилполиэтиленгликоля, при температуре 22-24°С, затем обрабатывают последовательно 10-15 минут 0,01-0,02 М фосфатно-солевым буфером с рН 7,2-7,4, содержащим 0,3-0,4 М глицина и 1-2% казеина, затем 10-15 минут 0,3-0,6%-ной перекисью водорода, после чего наносят специфические поликлональные антитела. Использование заявленного способа позволяет быстроту и точность диагностики цирковируса свиней. 1 з.п. ф-лы, 11 пр.