METHOD OF OBTAINING PNEUMOCOCCAL HYPERIMMUNE SERA

• Main Authors: Aparin Petr Gennadevich, Elkina Stanislava Ivanovna, Tokarskaya Marina Mikhajlovna, Yastrebova Nataliya Evgenevna
• Format: Patent
• Language: English; Russian
• Published: 07.07.2017
• Subjects: HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS

FIELD: medicine.SUBSTANCE: rabbit hyperimmunization is carried out by antigen, which is an antigen of plasmid-containing pneumococcus strain, inactivated with formalin. Vaccine immunization is performed in anauricular vein, wherein rabbit immunization with the mentioned antigen is carried out at an interval between each injection, then immunogenic properties are determined in producer, blood is collected, followed by separation and conservation of the resulting serum. In order to produce vaccine of one series, 16-hour culture grown on semi-synthetic nutritional medium is used, which cells are separated by centrifugation. Sludge is resuspended in physiological solution and is inactivated by warming-up, then cells are washed off with physiological solution containing 0.25% of formaldehyde, and microbial suspension corresponding to 4×10mcr.kl./ml is prepared, wherein pneumococcal microbial cells are washed off before immunization again. Vaccine immunization is carried out 3 times a week for 4 weeks: the first week at doses of 1×10mcr.kl./ml, the second week - 5×10mcr.kl./ml, the third week - 1×10mcr.kl./ml and the fourth week - 2×10mcr.kl./ml, in the fifth week blood is taken, serum is obtained and its activity is checked in the agglutination reaction (AR), which titer must be in the range of 1:3200-1:6400.EFFECT: use of this method enables to increase sera specific activity by using vaccines from microbial cells of each of the pneumococcal serotype and rabbit immunization scheme in the preparation.2 ex, 1 tbl Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения пневмококковых гипериммунных сывороток. Для этого проводят гипериммунизацию кроликов антигеном, представляющим собой инактивированный формалином антиген плазмидосодержащего штамма пневмококка. Иммунизацию вакциной проводят в ушную вену, причем иммунизацию кроликов указанным антигеном проводят с интервалом между каждой инъекцией, затем у продуцента определяют иммуногенные свойства, забирают кровь с последующим отделением и консервированием полученной сыворотки. Для получения вакцины одной серии используют 16-часовую культуру, выращенную на полусинтетической питательной среде, клетки которой отделяют центрифугированием. Осадок ресуспендируют в физиологическом растворе и инактивируют прогреванием, затем клетки отмывают физиологическим раствором, содержащим 0,25% формалина, и готовят микробную взвесь, соответствующую 4×10мкр.кл./мл, причем микробные клетки пневмококков перед иммунизацией еще раз отмывают. Иммунизацию вакциной проводят 3 раза в неделю в течение 4-х недель: первая неделя в дозах 1×10мкр.кл./мл, вторая - 5×10мкр.кл./мл, третья - 1×10мкр.кл./мл и четвертая - 2×10мкр.кл./мл, на пятой неделе берут кровь, получают сыворотку и проверяют ее активность в реакции агглютинации (РА), титр которой должен быть в пределах 1:3200-1:6400. Использование данного способа позволяет повысить специфическую активность сывороток за счет использования в приготовлении вакцин из микробных клеток каждого из серотипов пневмококка и схемы иммунизации кроликов. 2 пр., 1 табл.