METHOD FOR PRODUCING MULTIPLEX RICKETTSIAL DIAGNOSTIC PREPARATION

• Main Authors: DEZHUROV SERGEJ VALER'EVICH, PANTJUKHINA ANNA NIKOLAEVNA, VAKSHTEJN MAKSIM SERGEEVICH, TARASEVICH IRINA VLADIMIROVNA
• Format: Patent
• Language: English; Russian
• Published: 27.07.2015
• Subjects: HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES

FIELD: medicine.SUBSTANCE: method for producing a multiplex Rickettsial diagnostic preparation involves labelling Rickettsia and Coxiella corpuscular antigens with semiconductor colloidal nanoparticles of different fluorescent colours. The Rickettsiacorpuscular antigens are conjugated with the nanoparticles at a wavelength of red fluorescence (610-670 nm), and the Coxiella burnetii corpuscular antigen - with the nanoparticles at a wavelength of green fluorescence (520-540 nm). The conjugation process takes one hour and is accompanied by constant stirring. The unreacted nanoparticles are removed by Sephadex G-25 gel filtration chromatography. The labelled Rickettsia and Coxiella are combined into a multiplex diagnostic preparation to be used in the immunofluorescent nanoagglutination reaction (IFNAR). The multiplex diagnostic preparation enables detecting the anti-RickettsiaCoxiella burnetii antibodies simultaneously within one IFNAR.EFFECT: method simplifies the procedure of detecting the specific antibodies in human blood serum, reduces the reaction time twice and provides the more specific detection of the immunofluorescent analysis.3 tbl, 3 ex Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике риккетсиозов, и может быть использовано для выявления антител к риккетсиям Провачека и коксиеллам Бернета в сыворотке крови людей, а также при изучении иммунологической структуры населения и проверке эффективности вакцинации. Способ получения мультиплексного риккетсиального диагностикума включает в себя метку корпускулярных антигенов риккетсий и коксиелл полупроводниковыми коллоидными наночастицами разного цвета флуоресценции. Корпускулярные антигены риккетсий Провачека конъюгируют с наночастицами с длиной волны флуоресценции в красном диапазоне спектра (610-670 нм), а корпускулярный антиген коксиелл Бернета - с наночастицами с длиной волны флуоресценции в зеленом диапазоне спектра (520-540 нм). Конъюгацию проводят в течение 1 часа при постоянном перемешивании. Удаление непрореагировавших наночастиц проводят методом гель-фильтрации на сефадексе G-25. Затем меченые риккетсии и коксиеллы соединяют в мультиплексный диагностикум и используют его в иммунофлуоресцентной реакции наноагглютинации (ИФРНА). Мультиплексный диагностикум позволяет выявлять антитела одновременно к риккетсиям Провачека и коксиеллам Бернета в одной постановке ИФРНА. Способ упрощает выявление специфических антител в сыворотке крови людей, сокращает время проведения реакции в 2 раза и повышает специфичность детекции иммунофлуоресцентного анализа. 3 табл., 3 пр.