METHOD OF TRYPSIN IMMOBILISATION

• Main Authors: BERO IVAN LEONT'EVICH, LUKINA VIKTORIJA ALEKSEEVNA, SKOROKHODOVA LARISA ALEKSANDROVNA, GUSLAVSKIJ ALEKSANDR IGNAT'EVICH, RAEVSKIJ ALEKSANDR ANDREEVICH, JARYGINA ELENA IGOREVNA, SAMUJLENKO ANATOLIJ JAKOVLEVICH, KOCHISH IVAN IVANOVICH, EREMETS VLADIMIR IVANOVICH, MATVEEVA IRINA NIKOLAEVNA, FROLOVA MARINA ALEKSEEVNA, EREMETS NATAL'JA KIREEVNA, GRIN' SVETLANA ANATOL'EVNA, POPOVA VERA MIKHAJLOVNA
• Format: Patent
• Language: English; Russian
• Published: 27.12.2011
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: trypsin is immobilised by mixing a polymer carrier presented by vinyliden fluoride and hexafluoropropylene copolymer, fluoroelast, vinyliden fluoride and perfluoromethylvinyl ester copolymer, and a cross-linking agent. The enzyme amount varies within 0.0025 to 0.25 g in 1 g of the carrier, and the cross-linking agent 1,4-bis(2-mercaptobenzthiazolyl methylene-piperazine is taken in the amount 0.01-0.04 g per 1 g of the carrier. The ingredients are mixed either in roll mills, or in a mixer at temperature 37C. The prepared immobilised enzyme shows high proteolytic activity of a native preparation and dispersion activity necessary for producing high-grade cell cultures. ^ EFFECT: immobilisation increases a shelf life to 3 years, leads to enzyme stability and enables its reuse. ^ 3 tbl, 3 ex Осуществляют иммобилизацию трипсина смешением полимерного носителя, в качестве которого используют сополимер винилиденфторида и гексафторпропилена, фторэласт, сополимер винилиденфторида и перфторметилвинилового эфира и сшивающего агента. Количество фермента варьируют от 0,0025 до 0,25 г на 1 г носителя и сшивающего агента - 1,4 бис(2-меркаптобензтиазолилметилен)-пиперазина в количестве 0,01-0,04 г на 1 г носителя. Смешение проводят на вальцах или в смесителе при температуре 37°С. Полученный иммобилизованный фермент обладает высокой протеолитической активностью нативного препарата и диспергирующей активностью, необходимой для получения полноценных клеточных культур. Иммобилизация фермента увеличивает срок хранения до 3 лет и приводит к устойчивости фермента и возможности его многократного использования. 3 табл.