METHOD OF CARRYING OUT EXPRESS NBT-TEST OF LEUKOCYTES IN PERIPHERAL BLOOD OF DOGS

• Main Authors: TOKIN ALEKSEJ SERGEEVICH, STEKOL'NIKOV ANATOLIJ ALEKSANDROVICH, BOKAREV ALEKSANDR VLADIMIROVICH
• Format: Patent
• Language: English; Russian
• Published: 20.01.2010
• Subjects: INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; PHYSICS; TESTING

FIELD: veterinary. ^ SUBSTANCE: method of carrying out express NBT-test of leukocytes in peripheral blood of dogs includes mixing of blood with dissolved nitro blue tetrazolium (NBT), incubation, microscoping and calculation of positive and negative cells. In test-tube introduced and mixed are: 0.05 ml of fresh heparinised blood, 0.05 ml of 0.2% NBT solution on phosphate-salt buffer, then said mixture is incubated during 30 minutes at T=37 degrees Celcius, after the end of incubation 0.3 ml of 3.5% acetic acid solution is introduced into test tube, thoroughly mixed; aliquot of obtained mixture is taken and used to charge Goryaev chamber, cells are microscoped under magnification 40ù10, ensuring minimal visibility of non-stained cells, NBT-positive cells, which contain formazan in blood cytoplasm, and NBT-negative cells, which do not contain formazan, are calculated in differentiated way. ^ EFFECT: creation of simple, fast and efficient method of carrying express NBT-test in leukocytes of peripheral blood of dogs. Изобретение относится к ветеринарии. Способ проведения экспресс НСТ-теста лейкоцитов периферической крови собак включает смешивание крови с растворенным нитросиним тетразолием (НСТ), инкубирование, микроскопирование и подсчет позитивных и негативных клеток. В пробирку вносится и перемешивается: 0,05 мл свежей гепаринизированной крови, 0,05 мл 0,2% раствора НСТ на фосфатносолевом буфере, затем инкубируется в течение 30 минут при Т=37°С, после окончания инкубирования в пробирку вносится 0,3 мл 3,5% раствора уксусной кислоты, тщательно перемешивается, отбирается аликвота полученной смеси и ею заряжается камера «Горяева», микроскопируются клетки под увеличением 40х10, при обеспечении минимальной контрастности неокрашенных клеток, дифференцированно подсчитываются НСТ-позитивные клетки, содержащие в цитоплазме крови кристаллы формазана, и НСТ-негативные клетки, не содержащие формазан. Изобретение обеспечивает создание простого, быстрого и экономичного способа проведения экспресс НСТ-теста лейкоцитов периферической крови собак.