MONOCLONAL ANTIBODIES OF THE IGG1 CLASS RECOGNIZING THE ENZYME SIALIDASE OF GARDNERELLA VAGINALIS IN SAMPLES OF VAGINAL EXUDATES

• Main Authors: MEDINA FLORES Yolanda, MATA RUIZ Olga, VENCES VELAZQUEZ Amalia, PARRA ROJAS Isela, RODRIGUEZ NAVA Cynthia, ALARCON ROMERO Luz Del Carmen, CORTES SARABIA Karen
• Format: Patent
• Language: English; Spanish
• Published: 21.11.2022
• Subjects: CHEMISTRY; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES

The present invention relates to generating a hybridoma that produces monoclonal antibodies of the IgG1 class, explicitly recognizing the G. Vaginalis Sialidase enzyme. The Collection of Microorganisms of the National Center for Genetic Resources of INIFAP deposits said hybridoma under VMC_SLD_H8C8. Also, it consists of the fusion of spleen cells from an immunized mouse and X63Ag8.653 mouse myeloma cells. The antibody obtained (called GvSLD) consists of an immunoglobulin monomer with a molecular weight of 150 kDa and two antigenic recognition sites. Said antibody recognizes native and denatured forms of the sialidase enzyme and is helpful in an indirect ELISA technique to investigate the potential use of said enzyme as a biomarker and in the standardization of a method for the diagnosis of VB. Additionally, it is beneficial to investigate said enzyme's role during vaginal colonization through in vitro infection models using HeLa cells or bacterial strains isolated from biological samp les. Finally, said antibody is helpful in indirect ELISA, immunoprecipitation, and dot blot assays for different research purposes. La presente invención se refiere a la generación de un hibridoma que produce anticuerpos monoclonales de la clase IgG1, los cuales reconocen específicamente a la enzima sialidasa de G. vaginalis. Dicho hibridoma será depositado en la Colección de Microorganismos del Centro Nacional de Recursos Genéticos del INIFAP, con el nombre VMC_SLD_H8C8. Específicamente, el hibridoma consiste de la fusión de células de bazo de un ratón inmunizado y células X63Ag8.653 de mieloma de ratón. Por su parte, el anticuerpo obtenido (aquí llamado GvSLD) consiste en un monómero de inmunoglobulina con un peso molecular de 150 kDa y dos sitios de reconocimiento antigénicos. Particularmente, el anticuerpo obtenido por el método de la invención reconoce formas nativas y desnaturalizadas de la enzima sialidasa y puede emplearse en una técnica de ELISA indirecto para investigar el uso potencial de esta enzima como biomarcador y en la estandarización de un método para el diagnóstico de VB. Adicionalmente, podría usarse para la investigación del papel de esta enzima durante la colonización vaginal a través de modelos de infección in vitro utilizando células HeLa o cepas bacterianas aisladas a partir de muestras biológicas. Finalmente, el anticuerpo de la invención también es útil en ensayos de ELISA indirecto, inmunoprecpitación y dot blot, por lo que puede ser usado para distintos fines en la investigación.