Transformed insect cell line for increasing production of recombinant protein and use thereof

• Main Authors: BAE JUN SU, IM JIN WOONG, WOO SOO DONG, JI HO YOUNG
• Format: Patent
• Language: English; Korean
• Published: 10.07.2024
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

본 발명은 목적 재조합 단백질의 생산량 증대를 위한 형질전환 곤충 세포주 및 이의 용도에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 기탁번호 KCTC 15237BP로 기탁된 Tn-VV 곤충 세포주, (1) PiggyBac을 포함하며 누에의 Actin A3 프로모터 하에 네오마이신 저항성 유전자를 포함하는 pPIGA3-neo 벡터에, 서열번호 1의 bhsp70 프로모터 염기서열 및 서열번호 2의 vankyrin 유전자 염기서열; 및 서열번호 1의 bhsp70 프로모터 염기서열 및 서열번호 3의 V1f-1 유전자 염기서열;을 도입하여 상기 프로모터와 작동 가능하게 연결된 곤충세포 형질전환용 재조합 전이벡터 pPIGA3-neo-vankyrin-V1f-1을 제조하는 단계; (2) 상기 (1) 단계에서 제조한 재조합 전이벡터인 pPIGA3-neo-vankyrin-V1f-1 및 전이효소(transposase)를 갖는 헬퍼벡터를 곤충세포에 동시에 형질감염시키는 단계; 및 (3) 형질감염된 곤충세포를 대상으로 vankyrin 유전자 및 V1f-1 유전자가 상기 세포주의 게놈 내로 모두 도입되어 상시 발현되는 세포주를 선별하는 단계를 포함하는 곤충 바이러스를 이용한 목적 단백질 대량생산용 형질전환 곤충 세포주의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 형질전환 곤충 세포주에 목적 단백질을 코딩하는 유전자를 함유한 재조합 배큘로바이러스를 도입시키는 단계를 포함하는 곤충 세포주로부터에서 목적 단백질을 대량 생산하는 방법에 관한 것이다.