In vivo synthesis of sialylated compounds

• Main Authors: BEAUPREZ JOERI, VERCAUTEREN ANNELIES, COUSSEMENT PIETER, VAN HERPE DRIES, PETERS GERT
• Format: Patent
• Language: English; Korean
• Published: 10.07.2023
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

본 발명은 합성 생물학 및 대사 공학의 기술 분야에 있다. 보다 구체적으로, 본 발명은 대사 조작된 미생물 발효의 기술 분야에 있다. 본 발명은 세포내 생합성 경로를 통해 시알일화 화합물을 합성할 수 있도록 조작된 미생물을 개시하였다. 상기 미생물은 N-아세틸글루코사민-6-포스페이트를 N-아세틸 글루코사민으로 탈인산화하고, 상기 N-아세틸글루코사민을 N-아세틸만노사민으로 전환할 수 있다. 상기 미생물은 또한 N-아세틸만노사민을 N-아세틸-뉴라미네이트로 전환시키는 능력을 갖는다. 더욱이, 본 발명은 선택적으로 외인성 전구물질로, 예컨대 이에 한정되는 것은 아니지만 락토스, 락토N비오스, N-아세틸락토사민 및/또는 아글리콘을 포함하는 배양 배지에서 미생물을 배양하여, 시알일화 화합물의 대규모 인 비보 합성 방법을 제공하며, 상기 미생물은 세포내에서 N-아세틸글루코사민-6-포스페이트를 N-아세틸글루코사민으로 탈인산화하고, N-아세틸글루코사민을 N-아세틸만노사민으로 전환하며, 이를 N-아세틸-뉴라미네이트로 추가로 전환시킨다. This disclosure is in the technical field of synthetic biology and metabolic engineering. More particularly, this disclosure is in the technical field of fermentation of metabolically engineered microorganisms. This disclosure describes engineered micro-organisms able to synthesize sialylated compounds via an intracellular biosynthesis route. These micro-organisms can dephosphorylate N-acetylglucosamine-6-phosphate to N-acetyl glucosamine and convert the N-acetylglucosamine to N-acetylmannosamine. These micro-organisms also have the ability to convert N-acetylmannosamine to N-acetyl-neuraminate. Furthermore, this disclosure provides a method for the large scale in vivo synthesis of sialylated compounds, by culturing a microorganism in a culture medium, optionally comprising an exogenous precursor such as, but not limited to lactose, lactoNbiose, N-acetyllactosamine and/or an aglycon, wherein the microorganism intracellularly dephosphorylates N-acetylglucosamine-6-phosphate to N-acetylglucosamine, converts N-acetylglucosamine to N-acetylmannosamine and convert the latter further to N-acetyl-neuraminate.