ALA(DELTHA AMINOLEVULINIC ACID) SYNTHASE-EXPRESSION ESHERICHIA COLI AND MANUFACTURING METHOD OF BIOSYNTHETIC DELTA-AMINOLEVULINIC ACID USING THE SAME

• Main Authors: KIM, JAE HO, CHOI, CHAN, KANG, HEE BEOM, SEONG, HA JIN, CHOI, KYEONG CHUL, HONG, BEOM SIK
• Format: Patent
• Language: English; Korean
• Published: 06.05.2000
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

PURPOSE: ALA synthase-expression Escherichia coli is transformed with the expression vector. And a method for manufacturing biosynthetic ALA using the same is also provided CONSTITUTION: Provided is a method for producing ALA(biosynthesizing delta-aminolevulinic acid) using Escherichia coli which is in particular, transformed with an expression vector inserted hemA gene encoding ALA synthease of Bradyrhizobium japonicum, one of ALA synthesizing strain. The transformed Escherichia coli is cultivated in culture solution containing 30-120mM of glycine and 30-150mM of succinate and ALA is obtained by adding 30-90mM of levulinic acid thereto. 본 발명은 유전자 재조합 기술을 이용하여 ALA 생성 균주 중 하나인 브라디리조비움 야포니컴()의 ALA 신타아제(ALA synthase)를 코딩하는 hemA 유전자가 삽입된 발현벡터로 형질전환된 대장균 및 이를 이용한 생합성 ALA 제조방법에 관한 것이다. 본 발명은 브라디리조비움 야포니컴()의 hemA 유전자가 삽입된 발현벡터로 형질전환된 대장균을 작제하고, 이 대장균을 글리신 및 숙신산이 첨가된 배양액에 배양하면서 레불린산을 첨가하여 ALA를 수득하는 효율적인 생합성 ALA 제조방법을 제공한다. 본 발명의 생합성 ALA 제조방법에 따르면, 종래의 다른 균주에 의한 ALA 제조방법이 가지는 ALA 생산에 장시간이 소요되고, 배양 조건이 어려우며, 세포내 ALA 탈수효소(ALA dehydratase)의 피드-백 억제(feed-back inhibition) 현상에 의한 수율 저하 등의 문제점을 개선함으로써, 제초 활성을 나타낼 수 있는 농도인 3 내지 5mM 이상의 높은 수율로 ALA를 효율적으로 생산하여 정제단계가 없이도 제초제로서 활용할 수 있는 생합성 ALA를 제조할 수 있다.