PROCESS FOR PURIFYING UBNS4E1E2 PROTEIN

• Main Authors: CHO, JOONG MYUNG, CHOI, DUK YOUNG
• Format: Patent
• Language: English; Korean
• Published: 15.12.2000
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; SPIRITS; VINEGAR; WINE

PURPOSE: Provided is a method for purifying recombinant protein UBNS4E1E2 in a high yield which is useful in developing vaccines against hepatitis C virus and diagnosing hepatitis C more correctly. CONSTITUTION: The method for purifying recombinant protein UBNS4E1E2 is comprised of the next steps of: i) destroying E. coli where recombinant protein UBNS4E1E2 is expressed; ii) washing cell sediments with buffer solution containing triton X-100 and centrifuging it; iii) washing insoluble protein pellets with buffer solution containing urea and centrifuging it; iv) washing insoluble protein pellets with buffer solution containing guanidine hydrochloride; v) dissolving insoluble protein pellets in buffer solution containing SDS and centrifuging it; and vi) performing S-300 gel permission chromatography with obtained supernatant. 재조합 대장균으로부터 발현된 한국형 C 형 간염바이러스 항원 결정부위 융합 단백질인 UBNS4E1E2 재조합 단백질을 정제하는 방법에 있어서, 가) UBNS4E1E2 재조합 단백질이 발현된 재조합 대장균 세포배양액중의 대장균 세포를 파괴하는 단계; 나) 단계 가)의 세포 침전물을 1% 트리톤 X-100 을 함유한 완충액으로 세척하고 원심분리하는 단계; 다) 단계 나)의 불용해 단백질 침전물을 4M 우레아를 함유한 완충액으로 세척하고 원심분리하는 단계; 라) 단계 다)의 불용해 단백질 침전물을 6M 구아니딘 염산염을 함유한 완충액으로 세척하는 단계; 마) 단계 라)의 불용해 단백질 침전물을 1% SDS (나트륨 도데실 설페이트)를 함유한 완충액에 용해시키고 원심분리하는 단계; 바) 단계 마)의 상등액을 취하여 S-300 겔 투과 크로마토그래피시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 정제방법에 관한 것이다.