MUTANT BEETLE LUCIFERASE, GENES, RECOMBINANT VECTOR, TRANSFORMANT, AND METHOD FOR PRODUCING MUTANT BEETLE LUCIFERASE

• Main Authors: SHIMOMURA AI, NODA KENICHI, YAHATA SATOSHI
• Format: Patent
• Language: English; Japanese
• Published: 28.12.2017
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a mutant beetle luciferase, which is not easily affected by light emission inhibition by NaCl.SOLUTION: According to the present invention, there is provided a mutant beetle luciferase comprising a variation in an amino acid sequence encoding the wild-type beetle luciferase. Here, the variation is as follows: in an amino acid sequence of wild-type North American firefly luciferase, an amino acid corresponding to valine at position 288 is isoleucine, leucine, or phenylalanine; an amino acid corresponding to leucine at position 376 is proline; an amino acid corresponding to glutamic acid at position 455 is valine, alanine, serine, leucine, isoleucine, or phenylalanine; or an amino acid corresponding to glutamic acid at position 488 is valine, alanine, serine, leucine, isoleucine, or phenylalanine. The luminescence intensity due to a luciferin-luciferase luminescence reaction in a 0.9-mass% NaCl solution is 50% or more in a NaCl-free solution.SELECTED DRAWING: None 【課題】ＮａＣｌによる発光阻害の影響を受けにくい変異型甲虫ルシフェラーゼの提供。【解決手段】野生型甲虫ルシフェラーゼをコードするアミノ酸配列において、野生型北米ホタルルシフェラーゼのアミノ酸配列における、２８８位のバリンに相当するアミノ酸がイソロイシン、ロイシン若しくはフェニルアラニンであり、３７６位のロイシンに相当するアミノ酸がプロリンであり、４５５位のグルタミン酸に相当するアミノ酸がバリン、アラニン、セリン、ロイシン、イソロイシン若しくはフェニルアラニンであり、又は４８８位のグルタミン酸に相当するアミノ酸がバリン、アラニン、セリン、ロイシン、イソロイシン若しくはフェニルアラニンである変異を有しており、０．９質量％のＮａＣｌ溶液中におけるルシフェリン−ルシフェラーゼ発光反応による発光強度が、ＮａＣｌ非含有溶液中の５０％以上である、変異型甲虫ルシフェラーゼ。【選択図】なし