PRODUZIONE STABILE DI POLIPEPTIDE ATTIVO M-CSF

• Main Authors: MIZOGUCHI JUNZO, SATOH SAKAE, YAMASHITA TOMOYUKI, MAEDA TADASHI, KOBAYASHI JUNJI, KUBOTA AKIKO, TANIUCHI MASAHIKO, OTANI MASARU, NOGAWA MAKOTO
• Format: Patent
• Language: Italian
• Published: 23.02.1995
• Edition: 6
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROCESSES USING MICROORGANISMS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Vengono illustrati un vettore ricombinante ed una cellula animale trasformata che è stata trasformata dal vettore ricombinante ed ha la capacità di produrre polipeptide attivo M-CSF ad un livello elevato di produttività ed in maniera stabile. Il vettore ricombinante contiene un DNA con M-CSF asportato (un DNA contenente una porzione di un DNA che codifica una sequenza di amminoacidi che parte dallo N-terminale fino allo amminoacido 179 di un polipeptide che contiene peptide segnale M1-CSF e non contiene una parte o tutto il DNA che codifica amminoacidi a partire dall'amminoacido 180 al C terminale a valle di un promotore ed un DNA marcatore dhfr a valle di detto DNA con M-CSF asportato. Esso assicura la produzione in massa del polipeptide attivo M-CSF su scala industriale. A recombinant vector capable of expressing M-CSF active polypeptide containing an M-CSF-delete DNA (DNA containing DNA encoding the M-CSF amino acid sequence starting from the N-terminal to the 179 amino acid of a polypeptide which contains M1-CSF signal peptide and not containing a part or whole of the DNA encoding amino acids from the 180 amino acid to the C-terminal) downstream of a promoter and upstream of a dhfr marker DNA. The promoter is preferably SV40 early promoter. Also disclosed are animal cells, eg. CHO cells, transformed with the above vector. The transformants provide for a sustained, high level production of M-CSF active polypeptide.