NOVEL CYTOKINE

• Main Authors: OSHUMI, JUN, TAKIGUCHI, YO, KAWASHIMA, ICHIRO, MIYADAI, KENJI
• Format: Patent
• Language: English; Hungarian
• Published: 28.04.2000
• Edition: 6
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROCESSES USING MICROORGANISMS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Emberi csontvelő kötőszöveti sejtjeiből izolált mRNS segítségévelcDNS-t készítettek, melyet klónozás után emlőssejtekben expresszáltak.A sejttenyészet felülúszójában adipogenezist gátló aktivitást fedeztekfel, majd a szóban forgó tulajdonsággal rendelkező fehérjét asejttenyészet felülúszójából izolálták és tisztították. Ez a fehérjereduktív körülmények között végzett SDS-PAGE-vizsgálat során 23 000 Damolekulatömegűnek mutatkozott, és az Edman-lebontással végzett N-terminális aminosavszekvencia-meghatározás szerint N-terminálisaprolin. Mindezek és a génklónozás eredményeképp a fehérje teljeselsődleges szerkezetét felderítették, és bebizonyították, hogy aszóban forgó fehérje új szerkezetű, adipogenezist gátló aktivitássalrendelkező citokin. Az új, adipogenezist gátló faktor rekombináns DNS-technológia alkalmazásával a találmánynak megfelelően nagymennyiségben állítható elő, lehetővé téve így a különféle citopéniákés más betegségek kezelését és diagnosztizálását. ŕ cDNA prepared by extracting mRNA from the interstitial cells of the human bone marrow was expressed, after being cloned, with the cells of a mammal. A protein having an activity of inhibiting adipocyte formation was separated from the cell culture supernatant having such an activity and purified. The protein was found to have an apparent molecular weight of about 23,000 by conducting SDS-PAGE electrophoresis under a reducing condition and have an N-terminal proline residue as a result of identification of the N-terminal amino acid sequence by Edman degradation. The total primary structure of the protein was determined by the above-mentioned finding and the result of genetic cloning described above to reveal that it is a cytokine having an activity of inhibiting adipocyte formation and a new structure. Thus it has become possible to produce a novel adipocyte formation inhibitor in a large amount by the recombined DNA technology and to diagnose and treat various cytopeniae and other diseases.