Process for the preparation of a regiospecific porous particulate product, products obtained and application especially to chromatographic separations

• Main Authors: DELRIEU PASCAL, MENIALI JAOUAD, SAMAIN DANIEL, BOISNARD FLORENCE
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 19.04.1991
• Subjects: CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOIDCHEMISTRY; PERFORMING OPERATIONS; PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL; THEIR RELEVANT APPARATUS; TRANSPORTING

The invention relates to a process for the preparation of a regiospecific porous particulate product in which each porous particle has on its internal surface (3) specific physicochemical properties different from those of its external surface (2). The process consists (a) in grafting onto the particles an especially hydrophobic (5) ligand over all the internal and external surfaces, (b) in filling the pores by means of an enzymatically hydrolysable liquid protective compound, (c) in enzymatically hydrolysing the protective compound present at the external surface of the particles by means of an enzyme with a size greater than the size of the pores, (d) in carrying out an attack, especially chemical, on the particles by means of an agent which is reactive with respect to the ligand and immiscible with the protective compound with a view to selectively removing the ligand from the external surface, (e) in removing the protective compound still present in the particles, in particular by washing by means of a volatile liquid and (f), if appropriate, in grafting a hydrophilic ligand onto the external surface. The product thus prepared has a very marked regiospecific nature and can in particular be used for carrying out chromatographic separations of proteins. L'invention concerne un procédé de préparation d'un produit particulaire poreux régiospécifique dans lequel chaque particule poreuse possède sur sa surface interne (3) des propriétés physicochimiques spécifiques différentes de celles de sa surface externe (2). Le procédé consiste (a) à greffer sur les particules un ligand notamment hydrophobe (5) sur la totalité des surfaces interne et externe, (b) à remplir les pores au moyen d'un composé protecteur liquide enzymatiquement hydrolysable, (c) à réaliser une hydrolyse enzymatique du composé protecteur présent à la surface externe des particules au moyen d'une enzyme de taille supérieure à la taille des pores, (d) à réaliser une attaque, notamment chimique, des particules au moyen d'un agent réactif vis-à-vis du ligand et non miscible avec le composé protecteur en vue d'éliminer sélectivement le ligand de la surface externe, (e) à éliminer le composé protecteur encore présent dans les particules en particulier par lavage au moyen d'un liquide volatil et (f), le cas échéant, à greffer sur la surface externe un ligand hydrophile. Ainsi préparé, le produit présente un caractère régiospécifique très marqué et peut en particulier être utilisé pour effectuer des séparations chromatographiques de protéines.