Xilanasa mutante, método de fabricación y uso de la misma, y método para fabricar lignocelulosa sacarificada

• Main Authors: YANAI, Hisaaki, OSABE, Masami, OKAKURA, Kaoru, YOKOYAMA, Fumikazu, INOUE, Atsushi, TAMAI, Hiroki
• Format: Patent
• Language: Spanish
• Published: 07.04.2021
• Subjects: ANIMAL AND VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES AND WAXES; BAKERY PRODUCTS; BAKING; BEER; BIOCHEMISTRY; BLEACHING LEATHER OR FURS; CANDLES; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; DETERGENT COMPOSITIONS; DETERGENTS; DRY-CLEANING, WASHING OR BLEACHING FIBRES, FILAMENTS, THREADS,YARNS, FABRICS, FEATHERS OR MADE-UP FIBROUS GOODS; EDIBLE DOUGHS; ENZYMOLOGY; FATTY ACIDS THEREFROM; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; FODDER; FOODS OR FOODSTUFFS; HUMAN NECESSITIES; LAUNDERING; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PRESERVATION THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; RECOVERY OF GLYCEROL; RESIN SOAPS; SACCHARIDES, OTHER THAN SUCROSE, OBTAINED FROM NATURAL SOURCESOR BY HYDROLYSIS OF NATURALLY OCCURRING DI-, OLIGO- ORPOLYSACCHARIDES; SOAP OR SOAP-MAKING; SPIRITS; SUGAR INDUSTRY; TEXTILES; THEIR TREATMENT, NOT COVERED BY OTHER CLASSES; TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BYADDITION OF MATERIALS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; VINEGAR; WINE

Una xilanasa mutante que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2 con una sustitución del resto de aminoácido en la posición 154 en la cual el resto de lisina está sustituido con metionina y las siguientes sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (1), (2) o (3): (1) el resto de isoleucina en la posición 30 está sustituido con valina; el resto de asparagina en la posición 33 está sustituido con ácido aspártico; y el resto de glicina en la posición 36 está sustituido con arginina; (2) el resto de asparagina en la posición 33 está sustituido con ácido aspártico; el resto de glicina en la posición 36 está sustituido con arginina; el resto de treonina en la posición 90 está sustituido con serina; el resto de glutamina en la posición 132 está sustituido con arginina; el resto de serina en la posición 174 está sustituido con treonina; el resto de prolina en la posición 195 está sustituido con histidina; el resto de serina en la posición 197 está sustituido con asparagina; y el resto de glicina en la posición 217 está sustituido con ácido glutámico, (3) el resto de isoleucina en la posición 30 está sustituido con valina; el resto de serina en la posición 59 está sustituido con treonina; el resto de tirosina en la posición 239 está sustituido con histidina; y el resto de cisteína en la posición 242 está sustituido con serina o una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad del 90 % o más con al menos una de: (i) la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2 con la sustitución del resto de aminoácido en la posición 154 y las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (1); (ii) la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2 con la sustitución del resto de aminoácido en la posición 154 y las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (2), o; (iii) la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2 con la sustitución del resto de aminoácido en la posición 154 y las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (3), y que incluye la sustitución del resto de aminoácido en la posición 154 de la SEQ ID NO: 2 y al menos una seleccionada del grupo que consiste en: (a) las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (1), (b) las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (2), y (c) las sustituciones de restos de aminoácidos adicionales (3); en donde dicha xilanasa mutante es una xilanasa termoestable que proporciona una velocidad inicial de reacción que es al menos un 70 % de la proporcionada por la SEQ ID NO: 2 y que tiene una actividad xilanasa después del tratamiento con calor a 50 °C durante 24 horas que es al menos un 50 % de su actividad xilanasa antes del tratamiento con calor según lo determinado siguiendo el método de medición expuesto en la descripción, [0032]. What is aimed at is provision of an inexpensive and efficient saccharification method for lignocellulose using a thermostable mutant xylanase and provision of a thermostable mutant xylanase that has substitute amino acid residues, and that exhibits stable activity even under severe conditions in which enzymes easily inactivate, and that provides an initial rate of reaction not significantly reduced as compared to a wild-type xylanase corresponding to the mutant xylanase. Provided is a method of producing a saccharified product of lignocellulose, including contacting a lignocellulosic raw material with a thermostable mutant xylanase, and a thermostable mutant xylanase that provides an initial rate of reaction that is at least 70% of that provided by a wild-type xylanase corresponding thereto, that has a xylanase activity after heat treatment at 50 °C for 24 hours that is at least 50% of its xylanase activity before the heat treatment, and that has substitute amino acid residues.