Probiótico para el llanto infantil excesivo

• Main Authors: LAZARO MALLEN, Elisabet, ESPADALER MAZO, Jordi, CUNE CASTELLANA, Jordi
• Format: Patent
• Language: Spanish
• Published: 25.09.2018
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FOODS OR FOODSTUFFS; FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BYSUBCLASSES A23B - A23J; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL; PROCESSES USING MICROORGANISMS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS; SPIRITS; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OFNUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; THEIR TREATMENT, NOT COVERED BY OTHER CLASSES; VINEGAR; WINE

Una composición bacteriana que comprende de 104 a 1012 ufc/g de células viables de Pediococcus pentosaceus que tienen la capacidad de inducir la producción de interleucina-10, donde la producción de interleucina-10 por macrófagos THP-1 en presencia de células de Pediococcus pentosaceus expresada como incremento normalizado es superior a la producción de interleucina-10 por el control negativo, que son macrófagos THP-1 en ausencia de células de Pediococcus pentosaceus, cuando el incremento normalizado se determina mediante las siguientes etapas: (a) diferenciar monocitos THP-1 en macrófagos mediante el crecimiento de la línea celular de monocitos THP-1 de la colección de células de Public Health England, número de catálogo 88081201, en medio Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 con suero bovino fetal (FBS) al 10 % y con forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) hasta una concentración final de 0,16 μM; (b) dejar crecer los macrófagos THP-1 en medio RPMI 1640 con FBS al 10% en placas ELISA de 24 pocillos hasta una concentración final de 106 macrófagos/pocillo; (c) incubar durante 2,5 horas los macrófagos THP-1 con lipopolisacárido (LPS) a una concentración final de 10 ng/mL, y lavar los macrófagos THP-1con el medio solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (D-PBS); (d) tener preparado un cultivo de células de Pediococcus pentosaceus obtenido haciendo crecer las células en medio de Man, Rogosa y Sharpe (MRS) una noche a 37 ºC en una atmósfera con CO2 al 5 %; (e) añadir a cada pocillo ELISA 500 μL de medio RPMI 1640 con FBS al 10 % y una cantidad apropiada de una dilución de células de Pediococcus pentosaceus hasta obtener una relación final de 25:1, es decir, 2,5 x 107 ufc de células de Pediococcus pentosaceus: 106 macrófagos THP-1; (f) incubar los macrófagos THP-1 con las células de Pediococcus pentosaceus durante 2,5 horas a 37 ºC o sin las células de Pediococcus pentosaceus en las mismas condiciones como control negativo; (g) lavar los macrófagos THP-1 con medio D-PBS para eliminar las células de Pediococcus pentosaceus, posteriormente añadir a los macrófagos THP-1 medio RPMI 1640 con FBS al 10 % suplementado con 50 μg/mL de gentamicina, 10 μg/mL de ampicilina y 12 μg/mL de cloranfenicol, incubar a 37 °C con CO2 al 5-7 %, y tomar 25 partes alícuotas a las 5 y 24 horas; (h) centrifugar las partes alícuotas y ensayar los líquidos sobrenadantes para la cuantificación de interleucina-10 mediante citometría de flujo; y (i) calcular el incremento normalizado de la concentración de interleucina-10, con la fórmula (IL-1024h - IL-105h) / IL- 105h; donde IL-105h y IL-1024h es la concentración de interleucina-10 en pg/mL a 5 y 24 horas, respectivamente. Provided is a bacterial composition which comprises from 104 to 1012 cfu/g of Pediococcus pentosaceus cells which have the ability to induce the production of interleukin-10 to reduce inflammation in the intestinal tract among other features and is useful in the amelioration of excessive crying in infants.