Modification of nucleophilic proteins used in construction of e.g. enzymatic biosensors, by chemical reaction between nucleophilic groups free of protein residuals and halogenated derivatives, while controlling characteristics of proteins

• Main Authors: NARVAEZ GARCIA ARANTZAZU, DOMINGUEZ CANAS ELENA, SUAREZ GUILLAUME
• Format: Patent
• Language: English; Spanish
• Published: 01.11.2005
• Edition: 7
• Subjects: CHEMISTRY; METALLURGY; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES

Modification of nucleophilic proteins, comprises chemical reaction between nucleophilic groups free of protein residuals and halogenated derivatives, while controlling the characteristics of the proteins, such as net load and hydrophobicity, thus resulting in an isoelectric independent point of pH. In the case of oxidoreductase, this procedure permits the control of the constant transfer of electrons so much in the middle as directed. Modification of nucleophilic proteins, comprises chemical reaction between nucleophilic groups free of protein residuals and halogenated derivatives, while controlling the characteristics of the proteins, such as net load and hydrophobicity, thus resulting in an isoelectric independent point of pH. In the case of oxidoreductase, this procedure permits the control of the constant transfer of electrons so much in the middle as directed. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) Procedimiento de modificación nucleofilica de proteínas y su aplicación a la inmovilización de las mismas. El objeto de la invención es desarrollar un procedimiento de modificación de proteínas y su aplicación a la inmovilización de las mismas. El procedimiento consiste en la reacción química entre los grupos nucleofílicos libres de los residuos proteínicos y un derivado halogenado permite, a su vez el controlar las características de la proteína, tales como su carga neta e hidrofobicidad. El procedimiento descrito para la modificación de la carga neta de las proteínas resulta en un punto isoeléctrico independiente del pH. En el caso de oxidorreductasas, este procedimiento permite el control de la constante de transferencia de electrones tanto mediada como directa. Este procedimiento permite la incorporación de grupos negativos, positivos, hidrofobóbicos, hirofílicos o con cualquier funcionalidad preservando su actividad enzimática hasta un 80% o su constante de afinidad en el caso de anticuerpos. La modificación de la carga neta de las proteínas permite su deposición e inmovilización controlada mediante la obtención de estructuras supramoleculares a través de interacciones electrostáticas y que resulten en dispositivos con fines analíticos y/o sintéticos. El procedimiento de inmovilización se basa en la formación de bicapas a través de técnicas Langmuir-Blodgett o por fusión de vesículas. El procedimiento de modificación aquí descrito y su aplicación a la inmovilización de proteínas permite la construcción de biosensores enzimáticos e inmunosensores, así como sensores de DNA mediante el uso de estas enzimas modificadas como marcadores.