SELECCION ENTRE POSITIVOS Y NEGATIVOS EN EL CASO DE LA RECOMBINACION HOMOLOGA

• Main Authors: SPRENGER, RAIMUND, HONOLD, KONRAD, AUER, JOHANNES
• Format: Patent
• Language: Spanish
• Published: 11.11.2009
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

Procedimiento para la introducción de un ADN ajeno en una célula hospedante mediante recombinación homóloga, siendo transfectada la célula hospedante con un vector recombinante, que abarca dos secuencias de nucleótidos flanqueadoras, homólogas con respecto a una secuencia diana en el genoma de la célula hospedante, dentro de las cuales se encuentra una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador de selección positiva, y fuera de las secuencias flanqueadoras se encuentra una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador de selección negativa, que están unidas operativamente en cada caso con una secuencia de control de la expresión, activa en la célula hospedante, caracterizado porque como gen marcador de selección negativa se utiliza por lo menos una secuencia de nucleótidos, que codifica un polipéptido localizado junto a la superficie celular, verificándose que, después de una integración del vector mediante recombinación homóloga en el genoma de la célula, no es expresado el genmarcador de selección negativa, y que, después de una integración casual del vector en el genoma de la célula, es expresado el gen marcador de selección negativa, y el producto génico de éste es presentado en la superficie de la célula. The invention concerns a method for the introduction of a foreign DNA into the genome of a target cell by homologous recombination as well as for the homologous recombination of suitable DNA constructs.