METHODS OF INCREASING DIHYDROXY ACID DEHYDRATASE ACTIVITY TO IMPROVE PRODUCTION OF FUELS, CHEMICALS, AND AMINO ACIDS

• Main Authors: HAWKINS, ANDREW, LIES, DOUG, PETERS, MATTHEW, URANO, JUN, MEINHOLD, PETER, ARISTIDOU, ARISTOS, ALBERT, LYNNE, FELDMAN, RENNY, SMITH, CHRISTOPHER, PORTER-SCHEINMAN, STEPHANIE, DUNDON, CATHERINE ASLESON, BUELTER, THOMAS
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 03.01.2017
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention is directed to recombinant microorganisms comprising one or more dihydroxyacid dehydratase (DHAD)-requiring biosynthetic pathways and methods of using said recombinant microorganisms to produce beneficial metabolites derived from said DHAD-requiring biosynthetic pathways. In various aspects of the invention, the recombinant microorganisms may be engineered to overexpress one or more polynucleotides encoding one or more Aft proteins or homologs thereof. In some embodiments, the recombinant microorganisms may comprise a cytosolically localized DHAD enzyme. In additional embodiments, the recombinant microorganisms may comprise a mitochondrially localized DHAD enzyme. In various embodiments described herein, the recombinant microorganisms may be microorganisms of the Saccharomyces clade, Crabtree-negative yeast microorganisms, Crabtree-positive yeast microorganisms, post-WGD (whole genome duplication) yeast microorganisms, pre-WGD (whole genome duplication) yeast microorganisms, and non-fermenting yeast microorganisms. La présente invention concerne des microorganismes recombinants comprenant une ou plusieurs voies de biosynthèse nécessitant la dihydroxyacide déshydratase (DHAD) et des procédés d'utilisation desdits microorganismes recombinants afin de produire des métabolites bénéfiques dérivés desdites voies de biosynthèse nécessitant la DHAD. Dans divers aspects de l'invention, les microorganismes recombinants peuvent être modifiés pour surexprimer un ou plusieurs polynucléotides codant pour une ou plusieurs protéines Aft ou homologues de celles-ci. Dans certains modes de réalisation, les microorganismes recombinants peuvent comprendre une enzyme DHAD située dans le cytosol. Dans d'autres modes de réalisation, les microorganismes recombinants peuvent comprendre une enzyme DHAD située dans les mitochondries. Dans divers modes de réalisation décrits ici, les microorganismes recombinants peuvent être des microorganismes du clade des Saccharomyces, des microorganismes de levure négatifs au test de Crabtree, des microorganismes de levure positifs au test de Crabtree, des microorganismes de levure après duplication complète du génome (WGD), des microorganismes de levure avant duplication complète du génome (WGD), et des microorganismes de levure ne réalisant pas de fermentation.