ENZYME-CATALYZED METAL DEPOSITION FOR THE ENHANCED IN SITU DETECTION OF IMMUNOHISTOCHEMICAL EPITOPES AND NUCLEIC ACID SEQUENCES

• Main Authors: KOSMEDER, JEROME W, RODGERS, PAULA M, KERNAG, CASEY A, BIENIARZ, CHRISTOPHER, WONG, JENNIFER
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 15.09.2015
• Subjects: ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAININGELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN,SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMBINATORIAL CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; DERIVATIVES THEREOF; ENZYMOLOGY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES, IN SILICOLIBRARIES; MEASURING; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; NUCLEIC ACIDS; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; ORGANIC CHEMISTRY; PHYSICS; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; SPIRITS; SUGARS; TESTING; VINEGAR; WINE

The invention is directed to novel compositions of matter and methods of detecting in situ an immunohistochemical epitope or nucleic acid sequence of interest in a biological sample comprising binding an enzyme-labeled conjugate molecule to the epitope or sequence of interest in the presence of a redox-inactive reductive species and a soluble metal ion, thereby facilitating the reduction of the metal ion to a metal atom at or about the point where the enzyme is anchored. Novel phosphate derivatives of reducing agents are described that when exposed to a phosphatase are activated to their reducing form, thereby reducing metal ions to insoluble metal. L'invention porte sur des compositions novatrices de matière et des méthodes de détection in situ d'un épitope immunihistochimique ou de séquence d'acide nucléique d'intérêt dans un échantillon biologique comprenant la liaison d'une molécule conjuguée marquée par un enzyme à l'épitope ou à la séquence d'intérêt en présence d'espèces réductrices sans activités redox et un ion métallique soluble, facilitant ainsi la réduction de l'ion métallique en un atome métallique à un point, ou autour d'un point, où l'enzyme est ancré. Les dérivés de phosphate novateur des agents de réduction sont décrits qui, lorsqu'exposés à un phosphate, sont activés à leur forme de réduction, réduisant ainsi les ions métalliques en métal insoluble.