ISOTHERMAL DNA AMPLIFICATION

• Main Authors: LI, YIMENG, MITRAN, CATHERINE, MCKAY, ROSALIE D, LAM, JADE, GIBBS-DAVIS, JULIANNE M, KAUSAR, ABU
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 26.11.2019
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIREDCHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERSFROM A RACEMIC MIXTURE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The invention is directed to a method for isothermally amplifying a DNA sequence involving hybridizing a destabilizing DNA template to complementary nucleotide fragments to form a first nicked duplex; ligating the first nicked duplex to form a product duplex comprising the DNA sequence and the template, wherein the product duplex is capable of dissociating to release the DNA sequence and the template; and repeating these steps to generate multiple copies of the template and the DNA sequence. Further, the method may also involve hybridizing the DNA sequence to complementary destabilizing fragments or probes to form a second nicked duplex; ligating the second nicked duplex to form the product duplex comprising the DNA sequence and the template, wherein the product duplex dissociates to release the DNA sequence and the template; and repeating these steps to generate multiple copies of the template and the DNA sequence. Linvention concerne un procédé pour lamplification de manière isotherme dune séquence dADN consistant hybrider une matrice dADN déstabilisante à des fragments nucléotidiques complémentaires pour former un premier duplex entaillé, à lier le premier duplex entaillé pour former un produit duplex comprenant la séquence dADN et la matrice, le duplex de produit étant capable de se dissocier pour libérer la séquence dADN et la matrice, et à répéter ces étapes pour générer plusieurs copies de la matrice et de la séquence dADN. En outre, le procédé peut également consister à hybrider la séquence dADN à des fragments ou des sondes déstabilisantes complémentaires pour former un deuxième duplex entaillé, à lier le deuxième duplex entaillé pour former le produit duplex comprenant la séquence dADN et la matrice, le produit duplex se dissociant pour libérer la séquence dADN et la matrice, et à répéter ces étapes pour générer plusieurs copies de la matrice et de la séquence dADN.