A POROUS MEMBRANE DEVICE THAT PROMOTES THE DIFFERENTIATION OF MONOCYTES INTO DENDRITIC CELLS

• Main Authors: FAHLENKAMP, HEATHER, LI, CONAN, SANCHEZ-SCHMITZ, GUZMAN, MOE, DAVID, PARKHILL, ROBERT, HIGBEE, RUSSELL, DRAKE, DONALD, III, WARREN, WILLIAM L
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 24.02.2015
• Subjects: APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; COMPOSITIONS THEREOF; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; PHYSICS; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; TESTING; VINEGAR; WINE

Dendritic cells (DCs) for research and clinical applications are typically derived from purified blood monocytes that are cultured in a cocktail of cytokines for a week or more. Because it has been suggested that these cytokine-derived DCs may be deficient in some important immunological functions and might not accurately represent antigen-presenting cell (APC) populations found under physiologic conditions, there is a need for methods that allow the generation of DCs in a more physiologically relevant manner. The present invention comprises a simple and reliable technique for generating large numbers of highly purified DCs, based on a single migration of blood monocytes through endothelial cells that are cultured in, for example, a Transwell® device. The resultant APCs, harvested from the lower Transwell® chamber, resemble other in vitro-generated DC populations in their expression of major histocompatibility (MHC) and costimulatory molecules, ability to phagocytose foreign antigens, and capacity to trigger antigen-specific T cell responses. Les cellules dendritiques (CD) destinées à des applications de recherche et cliniques sont typiquement obtenues à partir de monocytes sanguins purifiés mis en culture dans un cocktail de cytokines pendant une semaine ou plus. Compte tenu du fait que, comme on l'a suggéré, ces CD dérivées de cytokines peuvent être dépourvues de certaines fonctions immunologiques importantes et qu'elles peuvent ne pas représenter exactement les populations de cellules présentant des antigènes (CPA) présentes dans les conditions physiologiques, on a besoin de procédés permettant de générer des CD d'une manière physiologiquement plus pertinente. La présente invention comprend une technique simple et fiable pour produire de grands nombres de CD hautement purifiées, basée sur une simple migration de monocytes sanguins dans des cellules endothéliales cultivées par exemple dans un dispositif Transwell®. Les CPA ainsi obtenues, récoltées dans la chambre inférieure du dispositif Transwell®, ressemblent à d'autres populations de CD générées in vitro par leur expression de molécules du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) et de molécules costimulatrices, par leur capacité de phagocytose d'antigènes étrangers et par leur capacité à déclencher des réponses antigène-spécifiques des cellules T.